[发明专利]G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物及其制备方法和在抗肿瘤活性中的应用

说明书

本发明属于药物化学领域，具体公开了一种G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物及其制备方法和在抗肿瘤活性中的应用。本发明以不同胆酸母体结构为原料，在催化剂作用下进行酯化反应，经保护基保护再甲基化，经过脱保护，水解反应，酰胺偶联反应最终得到一系列新的胆酸系列衍生物。本发明用MTT比色法对合成的新衍生物进行抗癌活性测试，结果显示合成的一系列G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，具有较好的抗癌活性。

技术领域

本发明属于药物化学领域，特别涉及一种G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物及其制备方法和在抗肿瘤活性中的应用。

背景技术

TGR5是G蛋白偶联受体(GPCR)超家族中的一员，其立体结构中有七个跨膜结构域，且其肽链的C端和连接第5、第6个跨膜螺旋的胞内环上都有G蛋白(鸟苷酸结合蛋白)的结合位点。细胞外的配体在细胞膜上特定的结合位点与GPCR相互作用，GPCR通过激活多种效应途径将细胞外信号转导到胞内下游级联。基于GPCR在不同细胞信号通路中的重要作用，GPCR已经成为治疗许多疾病的潜在药物作用靶点。人和动物多个组织如小肠、胃、肝、肺，特别是胎盘和脾脏中可以检测到高水平的TGR5 mRNA。胆酸(cholic acid)，去氧胆酸(deoxycholic acid)，鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholic acid)，甘胆酸(glycocholicacid)，石胆酸(lithocholic acid)，牛磺胆酸(taurocholic acid)，牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid)的母体结构如式1所示。

式1胆酸及其类似物的结构

2018年，Chen等人(Journal of Medicinal Chemistry(2018),61(17),7589-7613.)设计合成了TGR5肠道限制型噻唑烷激动剂，可以用于治疗Ⅱ糖尿病非酒精性脂肪肝以及肠炎。2019年Ali Nakhi等(J.Med.Chem.2019,62,6824-6830)以鹅去氧胆酸(CDCA)为主体进行C-7和C-24结构改造，所得目标化合物EC50相比CDCA缩小了100倍，提高了TGR5的效能，但并未报道抗癌活性。

发明内容

本发明拟选取两种不同的胆酸受体内源性配体母体结构为底物，进行酯化，甲基化，水解以及酰胺偶联反应，得到新的衍生物，并对新衍生物进行抗肿瘤活性测试。

胆酸受体内源性配体酰胺衍生物(式2)

式2

胆酸受体内源性配体酰胺衍生物的合成路线如下所示(式3):

式3.胆酸受体内源性配体酰胺衍生物的合成路线

胆酸受体内源性配体酰胺衍生物的具体合成方法步骤如下：

一、胆酸酰胺衍生物的合成方法

具体合成步骤为：

(1)将胆酸与酰胺偶联剂溶于溶剂中，冰浴下搅拌后加入胺类化合物，再加入碱后继续搅拌直至变为室温，得到酰胺衍生物5(a-f)。

其中，溶剂为二氯甲烷；酰胺偶联试剂为2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，碱为三乙胺，胺类化合物为四氢吡啶，吗啉，二甲胺，二乙胺，哌啶，Boc-哌嗪。

胆酸：偶联剂：碱：胺化合物的摩尔比为1:1:3:2.5；冰浴搅拌时间为30min，室温搅拌时间为12h。

二、7,12-二甲氧基胆酸酰胺衍生物的合成方法