[发明专利]G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物及其制备方法和在抗肿瘤活性中的应用

权利要求书

1.一种G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，所述衍生物的结构如式I所示：

其中，R₁、R₂为氢、β-羟基或β-甲氧基；

R₃为二乙胺基，哌啶基，Boc-哌嗪基；

所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物的制备方法步骤如下：

底物溶于溶剂中，在冰浴下加入酰胺偶联试剂，搅拌30min，加入碱和胺类化合物，室温搅拌12h，浓缩柱层析纯化得到胆酸受体内源性酰胺配体；

底物为R₁，R₂为β-羟基或氢的胆酸衍生物时，所述溶剂为二氯甲烷，酰胺偶联试剂为2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，碱为三乙胺，胺类化合物为二乙胺，哌啶，Boc-哌嗪；

或

(1)在常温条件下，底物溶于甲醇，加入对甲苯磺酸一水合物，室温搅拌12h，生成中间化合物1或9；

(2)步骤(1)所述中间化合物1或9和缚酸剂加入溶剂中搅拌，再加入保护基试剂和碱加热回流反应，浓缩柱层析纯化后得到中间化合物2或10；

(3)步骤(2)所述中间化合物2或10溶于溶剂中，加入甲基化试剂和碱，加热搅拌，浓缩柱层析纯化得产物化合物3或11；

(4)步骤(3)所述中间化合物3或11加入四丁基氟化铵，加热搅拌脱去TBS，再加入甲醇和氢氧化钠溶液，室温下反应，后处理得中间化合物4或12；

(5)步骤(4)所述中间化合物4或12与酰胺偶联试剂在冰浴条件下溶于溶剂中，加入碱和胺类化合物，室温搅拌12h，浓缩柱层析纯化得到胆酸受体内源性甲基化酰胺配体衍生物；

其中，底物为R₁，R₂为β-甲氧基或氢的胆酸衍生物。

2.如权利要求1所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，步骤(1)所述胆酸与对甲苯磺酸一水合物的摩尔比为1：0.1。

3.如权利要求1所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，步骤(2)所述缚酸剂为咪唑，溶剂为二氯甲烷，保护基试剂为叔丁基二甲基氯硅烷，碱为吡啶，加热回流温度为40-50℃，反应时间12-18h。

4.如权利要求1所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，步骤(3)所述溶剂为二氯甲烷，甲基化试剂为三氟甲磺酸甲酯，碱为2,6-二叔丁基吡啶，加热温度为25-45℃，反应时间24h。

5.如权利要求1所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，步骤(4)所述加热搅拌温度为40-50℃，加热搅拌时间为48h，室温搅拌时间为6-8h。

6.如权利要求1所述的G蛋白偶联胆酸受体内源性配体衍生物，其特征在于，步骤(5)所述酰胺偶联试剂为2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，溶剂为二氯甲烷，碱为三乙胺，胺类化合物为二乙胺，哌啶，Boc-哌嗪。