[发明专利]一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法

权利要求书

1.一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对小麦种子进行预处理，将预处理后的小麦种子的成熟胚刮碎，接种于添加有组蛋白去乙酰化酶抑制剂的预培养基中，在黑暗、25℃条件下培养7天，得到小麦成熟胚愈伤组织；

（2）将步骤（1）得到的小麦成熟胚愈伤组织转移到诱导培养基中，在黑暗、25℃条件下培养14天，得到胚性愈伤组织；

（3）将步骤（2）得到的胚性愈伤组织转移到分化培养基中，在光照16小时/天、光强3500Lux、温度25℃条件下培养21天；

步骤（1）中，所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自曲古抑菌素A或丁酸钠；所述曲古抑菌素A的加入浓度为0.5µM，丁酸钠的加入浓度为200µM；

步骤（1）中，所述预培养基以MS基本培养基为基础，并添加有0.75 g/L MgCl₂、15.0 g/L甘露醇、15.0 g/L 山梨醇、0.5 g/L 水解酪蛋白、10.0 g/L 葡萄糖、1.0 mg/L B₁维生素、0.5 mg/L B₃维生素、 0.5 mg/L B₆维生素、2.0 mg/L 甘氨酸、100 mg/L 肌醇、78 mg/L乙酰丁香酮、2.0 mg/L 2,4-D、 5.0 mg/L AgNO₃、40.0 mg/L 半胱氨酸、100.0 mg/L 维生素C和10 g/L琼脂；pH 5.8；

步骤（2）中，所述诱导培养基以MS基本培养基为基础，并添加有1.0 mg/L B₁维生素、0.5mg/L B₃维生素、0.5 mg/L B₆维生素、2.0 mg/L甘氨酸、100 mg/L 肌醇、3.0%蔗糖、2.0 mg/L2,4-D、5.0 mg/L AgNO₃和3.0 g/L植物凝胶；pH 5.8；

步骤（3）中，所述分化培养基以MS基本培养基为基础，并添加有1.0 mg/L B₁维生素、0.5mg/L B₃维生素、0.5 mg/L B₆维生素、2.0 mg/L甘氨酸、5.0 mg/L 谷氨酰胺、2.0%蔗糖、0.2mg/L IAA和3.0 g/L植物凝胶；pH 5.8。

2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述小麦种子来自小麦材料CB037、Fielder或中国春。