[发明专利]一种用于DNA聚合酶识别特异性的缓冲液及其应用

权利要求书

1.一种用于DNA聚合酶识别特异性的缓冲溶液，其特征在于，所述缓冲溶液包括少于四种碱基类型的dNTPs或少于四种碱基类型的dNTPs的类似物。

2.根据权利要求1所述的缓冲溶液，其特征在于，所述的缓冲溶液包括DNA聚合酶，所述DNA聚合酶包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的缓冲溶液，其特征在于，所述的缓冲溶液包括DNA聚合酶，所述的DNA聚合酶蛋白序列包含在一个或多个位置发生氨基酸取代的SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列 ；其中，所述一个或多个位置选自SEQ ID No:1所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位、第205位或其任意组合。

4.根据权利要求1所述的缓冲溶液，其特征在于，所述的缓冲溶液包括包括DNA聚合酶，所述的DNA聚合酶蛋白序列包含在多个位置发生氨基酸取代的SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列 ，其中，所述多个位置选自SEQ ID No:1所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位和第205位全部发生氨基酸取代。

5.根据权利要求4所述的缓冲溶液，其特征在于，SEQ ID No:1所示的氨基酸序列的第6位的氨基酸取代为脯氨酸、甘氨酸、羟脯氨酸、丝氨酸或苏氨酸，和/或第8位的氨基酸取代为异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸或正亮氨酸取代赖氨酸，和/或第10位的氨基酸取代为苏氨酸或丝氨酸，和/或第104位的氨基酸取代为甘氨酸或脯氨酸，和/或第205位的氨基酸取代为酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、或苏氨酸。

6.根据权利要求4所述的缓冲溶液，其特征在于，所述的DNA聚合酶包含如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列，或由如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列组成。

7.根据权利要求2至6任一权项所述的缓冲溶液，其特征在于，所述DNA聚合酶只识别选自碱基A、T、C和G中的三种碱基构成的核酸序列。

8.一种识别特异性DNA聚合酶，其特征在于，所述识别特异性DNA聚合酶在应用过程中，采用了权利要求1至6任一权项所述的缓冲溶液。

9.根据权利要求8所述识别特异性DNA聚合酶，其特征在于，所述DNA聚合酶只识别选自碱基A、T、C和G中的三种碱基构成的核酸序列。

10.一种权利要求1至6任一权项所述的缓冲溶液、或权利要求8或9所述识别特异性DNA聚合酶在生物或医学领域的应用。