[发明专利]补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法

权利要求书

1.补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，采用UHPLC-MS/MS方法，同时测定补骨脂药材中18种化学成分的含量。

2.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，所述18种化学成分包括：1补骨脂苷、2异补骨脂苷、3补骨脂素、4异补骨脂素、5花椒毒素、6 5-甲氧基补骨脂素、7异补骨脂二氢黄酮、8巴库查尔酮、9新补骨脂异黄酮、10补骨脂甲素、11补骨脂宁、12补骨脂定、13补骨脂乙素、14补骨脂二氢黄酮甲醚、15corylifol A、16补骨脂查尔酮、17异补骨脂色烯查尔酮、18补骨脂酚。

3.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，包含以下步骤：

步骤一：18种化学成分的标准曲线建立，方法为：分别精密称定18种化学成分对照品溶于甲醇，配置成具有已知浓度的各对照品储备溶液，混合，用甲醇稀释，配置成分别具有已知浓度的18种化学成分的对照品混合储备液，然后用体积分数为70-100％的甲醇将所述对照品混合储备液稀释成一系列分别具有不同已知浓度的18种化学成分的对照品混合溶液，将V1体积的各浓度的对照品混合溶液分别注入超高效液相色谱-质谱联用仪中，获得对照品在不同浓度下的多反应离子监测色谱图，然后以各对照品的色谱图峰面积Y为坐标轴，各对照品的浓度X为横坐标，通过线性回归运算得到各化学成分的标准曲线；

步骤二：补骨脂药材中18种化学成分的多反应离子监测色谱图的获得，方法为：将质量M的补骨脂药材粉碎，用体积分数60％的甲醇溶解至体积V2，超声提取45分钟，提取液过滤膜后作为供试品溶液，然后取体积V1供试品溶液注入超高效液相色皮-质谱联用仪中，获得补骨脂药材中各化学成分的多反应离子监测色谱图；

步骤三：补骨脂药材中18种化学成分的含量的确定，方法为：根据补骨脂药材中各化学成分的多反应离子色谱图的峰面积，以及各化学成分的标注曲线，确定补骨脂提取物中各化学成分的含量。

4.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，所述确定补骨脂提取物中各化学成分的含量，包括：从各化学成分的标准曲线中分别确定补骨脂药材中各化学成分的峰面积对应的浓度C浓，并按照下列公式分别计算出供试品中18种化学成分含量；

5.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，通过线性回归运算得到各化学成分的标准曲线，具体为：采用加权最小二乘法进行线性回归运算得到标准曲线，权重系数为1/X。

6.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，预设的色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶的固定相；流动相：A相为水，B相为乙腈；柱温：40℃；

流速：0.2mL/分钟；进样量3μL；采用梯度洗脱方法，洗脱程序为：0-2min，5-12％B；2-3min，12-20％B；3-7min，20–36％B；7–9min，36％B；9–11min，36–58％B；11–15min，58-78％B；15-16min，78-5％；16-20min，5％B。

7.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，特征在于，预设的质谱条件包括：

离子化方式：电喷雾离子化；多反应离子监测模式：正离子扫描和负离扫描；干燥气体温度：500℃；干燥气体流速10L/min；喷雾气压力10psi；干燥气体和雾化气体：氮气；离子化方式为电喷雾离子化。

8.如权利要求1所述的补骨脂药材中18种化学成分含量的测定方法，其特征在于，质谱参数如下：