[发明专利]紫草素外消旋体及其萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物的高效液相色谱拆分方法

说明书

本发明公开了一种紫草素外消旋体及其萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物的高效液相色谱拆分方法：采用高效液相色谱法，以直链淀粉‑三[(S)‑α‑甲基苄基氨基甲酸酯]为填料，以正己烷‑异丙醇混合溶剂为流动相，从紫草素外消旋体中拆分出高纯度的R‑(+)‑紫草素，以及从紫草素外消旋体萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物中拆分出高纯度的S‑(+)‑紫草素萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物，并结合一定的分离纯化手段，从而提高了R‑(+)‑紫草素的生产效率以及提高了利用中间体拆分法生产光学纯紫草素萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物的效率。

技术领域

本发明涉及一种手性药物的拆分方法，特别涉及高效液相色谱法拆分紫草素外消旋体及其萘茜母核羟基甲基化羰基肟衍生物。

背景技术

紫草(Lithospermum erythrorhizon)属于紫草科(Boraginaceae)多年生药用草本植物，山野自生，因其花、根、皮均显紫色，故名“紫草”。紫草始载于《神农本草经》，被列为中品，其“味苦，性寒”。紫草在《本草纲目》中也有记载，“花紫，根紫，可以染紫故名”。紫草是药典一部所收载的临床常用中药，有凉血、活血、解毒和透疹的功能，主治血热毒盛、麻疹不透、疮疡、湿疹、火热烫伤等(2020年版.中国医药科技出版社，2020，355)。硬紫草(Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc)主要有效成分为紫草素(Shikonin)及其衍生物，其侧链羟基手性碳的构型为R型。软紫草(Arnebia euchroma Johnst)，其主要有效成分为阿卡宁(Alkannin)及其衍生物(Zhou,W.et al.,Comparative study onenantiomeric excess of main alkannin/shikonin derivatives isolated from theroots of three endemic Boraginaceae plants in China.BiomedicalChromatography,2011,25(10),1067-1075)，阿卡宁是紫草素的对映异构体，其手性碳的绝对构型为S型。

近年来的研究表明，紫草素具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗甲状腺功能亢进、抗免疫力低下、降血糖、保肝护肝等多种生物学活性(夏玲红等，紫草素及其衍生物的药理作用研究进展。药学进展，2011，30(3):339-341)。临床上烧、烫伤用治疗药紫草油剂及软膏剂的主要成分即为紫草素。近期的研究表明，紫草素靶向新型冠状病毒在宿主细胞中进行复制、装配所必须的3CL蛋白酶，可能对新型冠状病毒有效(Jin,Z.et al.Structure of M^pro fromSARS-CoV-2 and discovery of its inhibitors.Nature,2020,582,289–293)，其抗人免疫缺陷病毒HIV的作用，也是近年来的研究热点之一。因此，以紫草素为先导化合物开发抗炎、抗肿瘤、抗病毒新药依然是药学领域研究的热点课题。此外，紫草素作为一种良好的天然色素，已广泛用于食品、化妆品和印染工业。

目前，硬紫草已经实现大面积的人工栽培，紫草的组织培养已进入工业化生产。采用提取分离的手段，从紫草药材中获得紫草素是目前制备该化合物的主要手段。然而，由于紫草产地、采收季节等存在差异，有效活性成分提取分离过程中有消旋化的问题，因此天然来源的紫草素光学纯度较低。采用有效的拆分方法，制备高光学纯度的紫草素，对开展其药用研究以及结构修饰研究具有重要意义。