[发明专利]基因修饰的NK细胞及其用途

说明书

本文公开了经基因修饰以包含编码C‑X‑C基序趋化因子受体1(CXCR1)的重组核酸的自然杀伤(NK)细胞、包含NK细胞的药物组合物、制备NK细胞的方法以及使用NK细胞治疗癌症或肿瘤的方法。在一个实施方案中，NK细胞共表达CXCR1以及NKG2D嵌合抗原受体(CAR)或EpCAM CAR。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年8月8日提交的新加坡申请号10201907378Q的优先权，其内容通过引用整体并入本文以用于所有目的。

技术领域

本发明一般涉及生物技术和细胞疗法领域。具体而言，本发明涉及用于癌症免疫疗法的基因修饰的NK细胞、其制备方法和在有需要的患者中的用途。

背景技术

近年来，在利用免疫效应细胞进行癌症治疗方面取得了巨大进展。使用表达嵌合抗原受体(CAR)的基因工程化的T淋巴细胞的癌症免疫疗法是治疗一些血液癌症的有效方法。CAR由细胞外抗原结合结构域(通常是来源于单克隆抗体的单链可变片段(scFv))和细胞内信号传导结构域组成。尽管最近在临床试验中取得了成功，但CAR修饰的T细胞仍然存在一些主要的限制。此外，为每位个体患者生产自体CAR-T细胞产品的需求在后勤上是苛刻的，并且对于在医疗实践中更广泛地采用具有限制性。其次，制造患者特异性的CAR-T细胞通常需要数周，这对于治疗患有晚期疾病的患者来说是重大缺陷。此外，并非总是可以从经过大量预治疗的患者中收集足够的淋巴细胞来产生足够数量的CAR-T细胞。同种异体的“现货”产品可以克服这些挑战，但同种异体T细胞会带来移植物抗宿主病(GVHD)的重大风险。

自然杀伤细胞(NK细胞)是一种淋巴细胞，它是先天免疫系统的一部分。NK细胞在癌症免疫监视中发挥着重要作用。与T细胞相比，它们不需要预先敏化和识别与主要组织相容性复合物(MHC)分子以复合物存在的肽抗原。相反，NK细胞的细胞毒性可以通过一系列天然受体的适当刺激而迅速触发，原则上这可以降低由CAR靶向抗原丢失而介导的复发或耐受性的风险。重要的是，在临床上转移同种异体NK细胞后的良好安全性且没有明显毒性(缺乏引起GVHD的可能性)被认为是相对于T细胞疗法的重要的实际优势。因此，使用自然杀伤(NK)细胞的过继细胞转移疗法是癌症患者最有希望的免疫治疗方式之一。然而，迄今为止，该方法的成功仅限于血液病恶性肿瘤患者。此外，由于实体瘤的特殊病理生理学特征，包括靶抗原异质性、CAR免疫细胞运输障碍以及肿瘤微环境的内在负调控机制，NK细胞疗法向非血液病恶性肿瘤的转化具有挑战性。

因此，本发明的目的是提供用于癌症免疫疗法的修饰的NK细胞，其解决了一些或所有上述问题。

发明内容

在一方面，本发明公开了一种自然杀伤(NK)细胞，该细胞经基因修饰以包含编码C-X-C基序趋化因子受体1(CXCR1)的重组核酸。

在另一方面，本发明公开了一种药物组合物，包含药学有效量的本发明的NK细胞和药学上可接受的赋形剂。

在另一方面，本发明公开了一种治疗有需要的受试者的癌症或肿瘤的方法，包括向受试者施用药学有效量的本发明的NK细胞或本发明的药物组合物。

在另一方面，本发明公开了一种治疗有需要的受试者的癌症或肿瘤的方法，该方法包括：(i)从受试者或与待治疗的受试者不同的供体获得NK细胞；(ii)提供编码CXCR1的重组核酸；(iii)将编码CXCR1的重组核酸转移到NK细胞中，以获得基因修饰的NK细胞；和(iv)向受试者施用药学有效量的从(iii)中获得的NK细胞。

在另一方面，本发明公开了一种治疗有需要的受试者的癌症或肿瘤的方法，该方法包括：(i)从受试者或与待治疗的受试者不同的供体获得NK细胞；(ii)提供编码CXCR1的重组核酸和编码重组嵌合抗原受体(CAR)的重组核酸；(iii)将编码CXCR1的重组核酸和编码重组CAR的重组核酸转移到NK细胞中，以获得基因修饰的NK细胞；和(iv)向受试者施用药学有效量的从(iii)中获得的NK细胞。