[发明专利]分离、检测和分析胎儿细胞的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于检测来自怀孕受试者的样品中的胎儿细胞的方法，所述方法包括：

(a)使所述样品与第一抗体接触，其中所述样品包含多个细胞；

(b)分离结合至所述第一抗体的细胞以产生富集样品；

(c)使所述富集样品与第二抗体接触；以及

(d)将结合至所述第二抗体的细胞鉴定为胎儿细胞，

其中所述第一抗体或所述第二抗体：

(i)是与髓系细胞触发受体样转录因子2(TREML2)蛋白结合的抗体；或者

(ii)包含与TREML2蛋白结合的抗原结合片段。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述胎儿细胞是胎儿有核红细胞(fnRBC)。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述第一抗体与一个或多个磁性颗粒缀合。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述磁性颗粒是胶体磁性颗粒。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述胶体磁性颗粒是铁磁流体磁性颗粒。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其中步骤(b)包括使所述样品经受磁场。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述磁性颗粒与第一外源性聚集增强因子(EAEF)偶联，所述第一EAEF包含选自以下的特异性结合对的一个成员：生物素-链霉亲和素、抗原-抗体、受体-激素、受体-配体、激动剂-拮抗剂、凝集素-碳水化合物、蛋白A-抗体Fc、和亲和素-生物素、生物素类似物-亲和素、脱硫生物素-链霉亲和素、脱硫生物素-亲和素、亚氨基生物素-链霉亲和素以及亚氨基生物素-亲和素。

8.根据权利要求7所述的方法，其中步骤(a)包括添加第二EAEF以诱导所述磁性颗粒的聚集，所述第二EAEF包含所述特异性结合对的另一成员。

9.根据权利要求8所述的方法，其中步骤(b)包括向所述富集样品中添加所述特异性结合对的成员以逆转所述富集样品中所述磁性颗粒的聚集。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法进一步包括，在步骤(a)之前，向所述样品中添加至少一种选自还原剂、免疫复合物、螯合剂和二氨基丁烷的聚集抑制剂。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述聚集抑制剂是螯合剂，其为EDTA。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二抗体是与TREML2蛋白结合的抗体或包含与TREML2蛋白结合的抗原结合片段。

13.根据权利要求12所述的方法，所述方法进一步包括，在步骤(d)之前，分离单个胎儿细胞。

14.根据权利要求13所述的方法，其中通过分离结合至所述第二抗体的单个胎儿细胞来分离单个胎儿细胞。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述第二抗体与标记缀合。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述标记是荧光标记。

17.根据权利要求16所述的方法，其中分离单个胎儿细胞是基于免疫荧光技术。

18.根据权利要求17所述的方法，其中通过荧光激活细胞分选(FACS)分离单个胎儿细胞。

19.根据权利要求17所述的方法，其中通过DEPArray分离单个细胞。