[发明专利]胰高血糖素制造方法

权利要求书

1.一种用于制备式I所示胰高血糖素(SEQ ID NO：1)的方法

包含使N端四肽(1-4)与C端肽(5-29)偶合，其中，所述C端肽包含至少一种伪脯氨酸二肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述N端四肽(1-4)为His(P)-Ser(P)-Gln(P)-Gly-OH，并且所述C端肽(5-29)为Thr(P)-Phe-Thr(P)-Ser(P)-Asp(P)-Tyr(P)-Ser(P)-Lys(P)-Tyr(P)-Leu-Asp(P)-Ser(P)-Arg(P)-Arg(P)-Ala-Gln(P)-Asp(P)-Phe-Val-Gln(P)-Trp(P)-Leu-Met-Asn(P)-Thr(P)，并且其中，至少一种丝氨酸或苏氨酸残基被伪脯氨酸保护；并且其中，P为侧链保护基团或不存在。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述方法是通过SPPS来执行。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，进一步包含制备所述C端肽(5-29)，所述制备包含以下步骤：

a)使α-氨基保护的苏氨酸与树脂偶合；

b)选择性裂解末端保护基团；

c)在偶合剂存在的情况下使后来的α-氨基保护的氨基酸或肽与步骤b)中获得的脱保护的氨基偶合；

d)重复步骤b)和c)以延长肽序列；

其中，至少一个步骤c)包含与伪脯氨酸二肽偶合。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述伪脯氨酸二肽选自由以下组成的组：

Fmoc-Asp(P)-Ser[psi(R₁，R₁)pro]-OH (Fmoc-pDS)

Fmoc-Asn(P)-Thr[psi(R₁，R₁)pro]-OH (Fmoc-pNT)

Fmoc-Tyr(P)-Ser[psi(R₁，R₁)pro]-OH (Fmoc-pYS)

Fmoc-Phe-Thr[psi(R₁，R₁)pro]-OH (Fmoc-pFT)和

Fmoc-Thr(P)-Ser[psi(R₁，R₁)pro]-OH (Fmoc-pTS)，

其中，P为保护基团或不存在，并且R₁为氢或甲基。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述伪脯氨酸二肽选自由以下组成的组：

Fmoc-Asp(OtBu)-Ser[psi(Me，Me)pro]-OH

Fmoc-Asn(Trt)-Thr[psi(Me，Me)pro]-OH

Fmoc-Tyr(tBu)-Ser[psi(Me，Me)pro]-OH

Fmoc-Phe-Thr[psi(Me，Me)pro]-OH和

Fmoc-Thr(tBu)-Ser[psi(Me，Me)pro]-OH。