[发明专利]用于高效生成瑞鲍迪苷的ABC转运蛋白在审
申请号: | 202080023632.3 | 申请日: | 2020-01-23 |
公开(公告)号: | CN113631698A | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | G·A·维克曼;S·隆德;J·勒尔曼;江汉笑;熊一 | 申请(专利权)人: | 阿迈瑞斯公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N9/10;C12N9/90;C12N9/88;C12N9/02;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/61;C07K14/415;C12P15/00;C12P19/56;C12P7/40;C12R1/865 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 罗文锋;彭昶 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 高效 生成 瑞鲍迪苷 abc 转运 蛋白 | ||
1.能够生成一种或多种甜菊糖苷(steviol glycoside)的经遗传修饰的宿主细胞,所述经遗传修饰的宿主细胞包含编码ABC转运蛋白的异源核酸,所述ABC转运蛋白包含与选自由下列组成的组的氨基酸序列具有至少80%序列同一性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、SEQID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:8、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、和SEQ ID NO:30。
2.根据权利要求1所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述ABC转运蛋白包含氨基酸序列,所述氨基酸序列具有选自由下列组成的组的序列:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、和SEQ ID NO:8。
3.根据前述权利要求任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其进一步包含核酸,所述核酸编码香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)、内根-柯巴基焦磷酸合酶(ent-copalylpyrophosphate synthase,CPS)、内根-贝壳杉烯合酶(ent-kaurene synthase,KS)、内根-贝壳杉烯19-氧化酶(ent-kaurene 19-oxidase,KO)、内根-异贝壳杉烯酸13-羟化酶(ent-kaurenoic acid 13-hydroxylase,KAH)、细胞色素p450还原酶(CPR)、以及一种或多种UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)。
4.根据权利要求3所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述一种或多种UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)选自由下列组成的组:UGT85C2、UGT74G1、UGT91D_like3、UGT76G1、EUGT11、和UGT40087。
5.根据权利要求4所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)包含与SEQ ID NO:9具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,所述内根-柯巴基焦磷酸合酶(CPS)包含与SEQ ID NO:10具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,所述内根-贝壳杉烯合酶(KS)包含与SEQ ID NO:11具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,所述内根-贝壳杉烯19-氧化酶(KO)包含与SEQ ID NO:12具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,所述内根-异贝壳杉烯酸13-羟化酶(KAH)包含与SEQ ID NO:13具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,所述细胞色素p450还原酶(CPR)包含与SEQ ID NO:14具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,和所述一种或多种UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)包含与选自由下列组成的组的氨基酸序列具有至少80%序列同一性的氨基酸序列:SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19。
6.根据权利要求5所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列,所述内根-柯巴基焦磷酸合酶(CPS)包含SEQ IDNO:10的氨基酸序列,所述内根-贝壳杉烯合酶(KS)包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列,所述内根-贝壳杉烯19-氧化酶(KO)包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列,所述内根-异贝壳杉烯酸13-羟化酶(KAH)包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列,所述细胞色素p450还原酶(CPR)包含SEQID NO:14的氨基酸序列,和所述一种或多种UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)包含选自由下列组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ IDNO:19。
7.根据前述权利要求任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞选自细菌细胞、真菌细胞、藻类细胞、昆虫细胞和植物细胞。
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