[发明专利]组合物、方法及其用途

说明书

一种用于递送至细胞的纳米颗粒复合物，该纳米颗粒复合物包含RNA干扰剂和由脂质体和肽组成的递送媒介物。肽可以是跨膜的，该肽的至少一部分位于脂质体的外部。递送媒介物用于将RNA干扰剂递送至细胞。RNA干扰剂可以靶向E3泛素连接酶Itch的活性。复合物可以用于治疗耐化学疗法的肿瘤和/或癌症。还涉及其组合物、组合、试剂盒、方法和用途。

发明领域

本发明涉及组合物、组合或试剂盒、使用方法及其用途。特别地，本发明涉及用于在治疗癌症中使用的组合物、组合或试剂盒，以及使用这样的组合物、组合或试剂盒治疗癌症的方法，其中RNA干扰剂被递送至细胞。

背景

RNA干扰(或RNAi)是RNA分子通过中和靶向的mRNA分子来抑制基因表达或翻译的生物学过程。为了使RNA干扰剂起作用，它们必须完整地到达mRNA靶。然而，这可能难以实现，特别是在体内难以实现。虽然已经使用各种递送系统来尝试将RNA干扰剂递送至体外和/或体内的细胞，但是每种靶和每种RNA干扰剂自身都呈现出挑战。

RNA干扰剂已被建议作为靶向耐药肿瘤细胞的一种可能方式。例如，p53突变导致肿瘤细胞的耐药性，这影响治疗功效，并且因此已经探索了替代的肿瘤抑制途径。E3泛素连接酶ITCH负调节肿瘤抑制蛋白p73(TP73)，提供了增强肿瘤细胞对治疗的敏感性的治疗性靶。这种途径可以使用RNA干扰剂来靶向，条件是它们可以被成功地递送至细胞。能够这样做，将可能提供用于其他耐药肿瘤细胞的治疗，诸如用于胰腺癌和神经母细胞瘤中证明的那些的治疗。用于调节Itch泛素化酶活性的RNA干扰剂，特别是siRNA，描述于WO2006/077407中，该文献通过引用并入本文。

神经母细胞瘤是儿童恶性肿瘤，占所有儿科癌症死亡率的～13％(Louis和Shohet,2015)。一些类型的神经母细胞瘤在治疗过程期间易于发展耐药性(Lai等人，2012)。导致这种现象的基因之一是p53(Xue等人，2007；Keshelava等人，2001；Huang等人，2010；Tweddle等人，2001)，p53是一种良好表征的肿瘤抑制蛋白，p53与介导肿瘤细胞凋亡的各种转录因子结合(Vogelstein等人，2000；Vousden和Lu，2002)。p53突变导致肿瘤细胞死亡受损，并且最终导致对化学疗法治疗无反应(Vogelstein等人，2000；Vousden和Lu，2002；Xue等人，2007)。

恢复或重新激活p53功能用于肿瘤疗法(He等人，2015；Bykov和Wiman,2003；Wiman,2007；Chen等人，2014；Ventura等人，2007；Martins等人，2006)的尝试正在研究中，但利用替代途径来代偿缺失的p53功能可以是可能的(Ramadan等人，2005；Rossi等人，2004；Venkatanarayan等人，2016)。TP73是p53的同源分子，并且特别在DNA结合结构域(DBD)、激活结构域(AD)和四聚化结构域(TD)中共有显著的序列相似性(Willis等人，2003)。TP73通过其结合参与凋亡的转录靶基因的能力显示出肿瘤抑制活性。TP73的过表达促进转化细胞的凋亡。此外，p73突变在人类癌症(Venkatanarayan等人，2016)包括神经母细胞瘤(Ejeskar等人，1999；Ichimiya等人，1999)中不常见，使其成为操纵用于无p53的肿瘤(p53 null tumours)的治疗性干预的有吸引力的基因。