[发明专利]在线色谱法和电喷雾电离质谱仪在审
| 申请号: | 202080008390.0 | 申请日: | 2020-01-23 | 
| 公开(公告)号: | CN113301974A | 公开(公告)日: | 2021-08-24 | 
| 发明(设计)人: | 章乾 | 申请(专利权)人: | 瑞泽恩制药公司 | 
| 主分类号: | B01D15/34 | 分类号: | B01D15/34;B01D15/36;C07K16/00 | 
| 代理公司: | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人: | 李程达 | 
| 地址: | 美国*** | 国省代码: | 暂无信息 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 在线 色谱 喷雾 电离 质谱仪 | ||
1.一种用于表征蛋白质的方法,所述方法包括:
使包含所述蛋白质的样品与具有尺寸排阻色谱树脂的色谱系统接触;
使用流动相洗涤所述尺寸排阻色谱树脂以提供包含所述蛋白质的洗脱液;和
在天然条件下使用电喷雾电离质谱仪表征所述洗脱液中的所述蛋白质。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述电喷雾电离质谱仪耦接至具有所述尺寸排阻色谱树脂的所述色谱系统。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述电喷雾电离质谱仪为纳米电喷雾电离质谱仪。
4.如权利要求1所述的方法,其中使用至少一个三路分流器将所述电喷雾电离质谱仪耦接至具有所述尺寸排阻色谱树脂的所述色谱系统。
5.如权利要求1所述的方法,其中使用至少一个三路分流器将紫外光检测器耦接至具有所述尺寸排阻色谱树脂的所述色谱系统。
6.如权利要求5所述的方法,其中通过洗涤所述尺寸排阻色谱树脂得到的所述洗脱液通过所述至少一个三路分流器以约0.2mL/min至约0.4mL/min的流速引入到所述紫外光检测器中。
7.如权利要求1所述的方法,其中用于洗涤所述尺寸排阻色谱树脂的所述流动相包含乙酸铵。
8.如权利要求1所述的方法,其中用于洗涤所述尺寸排阻色谱树脂的所述流动相包含挥发性盐。
9.如权利要求1所述的方法,其中用于洗涤所述尺寸排阻色谱树脂的所述流动相具有约100mM的总浓度。
10.如权利要求1所述的方法,其中用于洗涤所述尺寸排阻色谱树脂的所述流动相具有约0.2mL/min至约0.4mL/min的流速。
11.如权利要求1所述的方法,其中用于洗涤所述尺寸排阻色谱树脂的所述流动相具有约6.8的pH。
12.如权利要求1所述的方法,其中与所述色谱系统接触的包含所述蛋白质的所述样品的量为约10μg至约100μg。
13.如权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质为抗体。
14.如权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质为单克隆抗体。
15.如权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质为治疗性抗体。
16.如权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质为抗原-抗体复合物。
17.如权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质包括抗体-药物缀合物中所包含的抗体。
18.如权利要求1所述的方法,其中通过洗涤所述尺寸排阻色谱树脂提供的所述洗脱液以小于约50μl/min的流速引入到所述电喷雾电离质谱仪中。
19.如权利要求1所述的方法,其中通过洗涤所述尺寸排阻色谱树脂提供的所述洗脱液引入到所述电喷雾电离质谱仪中,其中来自所述电喷雾电离的电喷雾的流速为约10nL/min至约50nL/min。
20.如权利要求1所述的方法,其中通过洗涤所述尺寸排阻色谱树脂提供的所述洗脱液引入到所述电喷雾电离质谱仪中,其中电喷雾的喷雾电压为约0.8kV至约1.5kV。
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