[实用新型]一种提高体细胞克隆融合效率的电融合槽有效

专利信息
申请号: 202020576134.9 申请日: 2020-04-17
公开(公告)号: CN212152344U 公开(公告)日: 2020-12-15
发明(设计)人: 刘红波;吕培茹;王彦涛 申请(专利权)人: 河南创源生物技术有限公司
主分类号: C12M1/42 分类号: C12M1/42
代理公司: 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 代理人: 白小明
地址: 450000 河南省郑州市航空港区新*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 体细胞 克隆 融合 效率
【说明书】:

实用新型公开了一种提高体细胞克隆融合效率的电融合槽,包括融合槽主体和位于融合槽底部的两个电极,两个电极并列设置,两个电极和融合槽主体的底部共同围绕形成操作凹槽,操作凹槽的内部设置有平铺在操作凹槽底部的尼龙网层,尼龙网层形成40‑150μm的网格,总之本实用新型具有操作难度低、操作人员培训难度小、融合效率低和便于克隆技术推广的优点。

技术领域

本实用新型属于涉及动物克隆技术领域,尤其涉及一种提高体细胞克隆融合效率的电融合槽。

背景技术

自从1997年体细胞克隆绵羊“多莉”诞生以来,体细胞克隆技术已经在众多物种中得到应用,目前体细胞客户技术在美国、日本、澳大利亚和阿根廷等国已经进行了产业应用和推广,在中国也有商业化的克隆公司开始进行猪、牛、犬、猫和马的商业化推广,逐渐的推动克隆技术市场化的进程。而针对体细胞克隆技术本身,体细胞克隆技术不仅可以提高畜牧业的生产效率,还可以大力推动异种器官移植、动物生物反应器和人源化抗体等生物医药领域的巨大进步,从而推动相关行业科学技术的发展,近年来也是得到越来越多的重视。体细胞克隆技术作为一项比较新的技术,对体细胞克隆技术的研究从未停止,而且研究力度越来越大,总结下来影响体细胞克隆技术效率的因素有很多,其中电融合效率是非常重要的一环,常见动物的卵母细胞直径一般为100-150μm,呈规则的球形结构,同时在细胞培养皿底可以自由滚动,而用于体细胞克隆的体外培养细胞,在悬浮状态一般为球形结构,直径一般为10-30μm,也容易发生自由滚动的情况,都对电融合的效率造成一定的影响。常见动物的克隆大多采用电融合法,即将卵母细胞核去除之后,将球形体外培养细胞显微注射到卵母细胞透明带之下,并与卵母细胞胞质贴紧,然后在电脉冲刺激下,培养体细胞细胞膜与卵母细胞细胞膜融合到一起,体细胞则整体融入卵母细胞胞质中,完成重构胚胎的构建,在化学或电刺激下,重构胚胎启动发育,最后将其移植到动物体内即可获得克隆动物。

但是目前采用电融合法的动物克隆技术还存在许多问题,其中整个电融合难点在于,在卵母细胞透明带下,体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜的接触面必须与电场的方向垂直,才可以完成融合。正常情况下,技术人员需要长时间的培训,在显微镜下,在充满电融合液的融合槽中,用微针拨动球状的卵母细胞,使得体细胞膜与卵母细胞膜的接触面与电场方向保持垂直,整个过程操作难度很长大,因为液面的轻微抖动,微针在融合液的轻微摆动,都会使得卵母细胞发生转动而脱离预定垂直位置,因此电融合方法成为全球范围内体细胞克隆应用的重要制约因素,急需相对的技术来解决上述的问题。

实用新型内容

本实用新型的目的在于:提供一种提高体细胞克隆融合效率的电融合槽,解决目前体细胞电融合过程中存在的操作难度大、融合效率低和不便于克隆技术推广的技术问题。

本实用新型采用的技术方案如下:

一种提高体细胞克隆融合效率的电融合槽,包括融合槽主体和位于融合槽底部的两个电极,两个电极并列设置,两个电极和融合槽主体的底部共同围绕形成操作凹槽,操作凹槽的内部设置有平铺在操作凹槽底部的尼龙网层,尼龙网层形成40-150μm的网格。

进一步的,操作凹槽为开口向上的矩形槽,两个电极的形状均为大小相同的长方体。

进一步的,尼龙网层覆盖整个操作凹槽的底部。

进一步的,两个电极的端部分别连接有导电线,两个导电线位于两个电极的同侧端部,两个电极分别通过对应的导电线与电融合槽的电源连接。

综上所述,由于采用了上述技术方案,本实用新型的有益效果是:

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