[发明专利]一种用于检测猪圆环病毒4型的引物对、探针、试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 202011638345.1 | 申请日： | 2020-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN112646931A | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 周远成;骆辉;阴文奇;高露茜;李书伟;邝声耀 | 申请（专利权）人： | 四川省畜牧科学研究院;畜科生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 610000*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 圆环 病毒 引物 探针 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种用于检测猪圆环病毒4型的引物对，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示的特异性引物。
2.根据权利要求1所述的用于检测猪圆环病毒4型的引物对，其特征在于，采用所述引物对进行PCR检测时，还需使用如SEQ ID NO.3所示的探针。
3.一种用于检测猪圆环病毒4型的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物对以及权利要求2所述探针。
4.一种猪圆环病毒4型的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测样本DNA；
(2)以步骤(1)所得DNA为模板，采用权利要求1所述引物和权利要求3所述探针对其进行PCR扩增，回收纯化扩增产物后，根据检测结果判断是否含有猪圆环病毒4型。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述PCR反应体系为：2×Premix ExTaqTM 12μL、PCV4-F 1μL、PCV4-R 1μL、PCV4探针1μL、模板DNA2.0μL，最后用ddH2O补充至20μL。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述PCV4-F、PCV4-R以及PCV4探针的浓度均为0.5μmol/L。
7.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述PCR反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性10s；60℃退火30s，共40个循环。
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