[发明专利]一种吗替麦考酚酸及其杂质的检测方法

说明书

本发明公开了一种吗替麦考酚酸及其杂质的检测方法，属于分析化学技术领域。本发明的检测方法为：配制待测样品溶液，分别注入高效液相色谱仪，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以甲酸水溶液和乙腈为流动相，利用紫外检测器或二极管阵列检测器检测。本发明的检测方法能够准确检测吗替麦考酚酸，将吗替麦考酚酸与杂质(Z)‑吗替麦考酚酸完全分开，分离度高，消除了杂质(Z)‑吗替麦考酚酸对吗替麦考酚酸的影响，而且该方法稳定可靠，灵敏度高，专属性强。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种吗替麦考酚酸及其杂质的检测方法。

背景技术

吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MPM)，化学名称为：反式-6-(1,3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-5-异苯并呋喃基)-4-甲基-4-己烯酸-2-(4-吗啉基)乙醇酯,其结构如式(Ⅰ)所示：

吗替麦考酚酯是由瑞士罗氏(Roche)公司研发的一种新型免疫抑制剂，于1995年首次在美国上市，商品名为骁悉，在体内脱酯化后形成具有免疫抑制活性的代谢产物麦考酚酸(mycophenolic acid,MPA)。麦考酚酸酯最初是作为一种抗细菌和抗真菌的药物，20世纪60年代后期开始作为抗肿瘤药物应用于临床。直到20世纪80年代，在寻找高选择低毒性的免疫抑制剂治疗自身免疫性疾病的药物时，麦考酚酸酯的抑制免疫作用才被学术界发现。1995年5月，麦考酚酸酯获得美国食品药品管理局(FDA)批准用于预防肾移植急性排异反应。其免疫抑制的作用机制是选择性抑制与排斥反应相关的T淋巴细胞和B淋巴细胞，并且有抑制动脉平滑肌增生的作用，后者是目前其他免疫抑制剂所不具备的。

目前文献报道合成吗替麦考酚酯的方法主要以麦考酚酸为起始原料合成，所用麦考酚酸结构如式(Ⅱ)所示：

在合成的吗替麦考酚酯中的一个关键杂质为(Z)-吗替麦考酚酯，我们发现(Z)-吗替麦考酚酯是由于麦考酚酸中的杂质(Z)-麦考酚酸导致的，(Z)-麦考酚酸的结构如式(Ⅲ)：

由于现有技术中没有分离检测吗替麦考酚酸与(Z)-吗替麦考酚酸的方法，吗替麦考酚酸在合成吗替麦考酚酯的过程中(Z)-吗替麦考酚酸被酯化成(Z)-吗替麦考酚酯，影响合成吗替麦考酚酯的质量。因此，开发一种分离检测吗替麦考酚酸与(Z)-吗替麦考酚酸的方法，对于实现吗替麦考酚酯的质量控制具有极其重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种分离吗替麦考酚酸及其杂质的方法，该方法能够有效检控吗替麦考酚酸生产过程中(Z)-吗替麦考酚酸的含量，而且该方法稳定可靠，灵敏度高，专属性强，为吗替麦考酚酯起始原料的制备提供了一种便利的检测方法。

本发明的技术方案如下：

一种吗替麦考酚酸及其杂质的检测方法，其特征在于：配制待测样品溶液，分别注入高效液相色谱仪，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以流动相A和流动相B进行洗脱，利用紫外检测器或二极管阵列检测器检测；所述流动相A为甲酸水溶液，所述流动相B为乙腈为流动相。

优选地，所述方法中色谱柱为XSelect HSS T3色谱柱或XSelect HSS PFP色谱柱。

优选地，所述方法中色谱柱规格为4.6×250mm，5μm。

优选地，所述流动相A的体积分数为0.1％～0.2％的甲酸水溶液。

优选地，所述方法中流动相A的pH为4.8～5.2。

优选地，所述方法中流动相流速为1.2～1.7ml/min。

优选地，所述方法中进样体积为10～20μl。