[发明专利]一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种苯磷硫胺中间体有关物质的检测方法，包括如下步骤：(1)配制供试品溶液；(2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为4.6mm×150mm，填料粒径为5μm，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速为1ml/min进行梯度洗脱；(3)分别吸取供试品溶液和对照溶液，注入高效液相色谱仪，进行HPLC分析。本发明对样品成分保留能力强，分离度好；下能够准确检测出已知杂质，且主峰与已知杂质峰能够达到有效分离，可用于苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法。

背景技术

苯磷硫胺(Benfotiamine),化学名为苯甲酸-硫-2-[[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)甲基]甲酰胺基]-1-[2-(膦酰氧乙基)-1-丙烯基]酯，是由东和药品株式会社研发，1981年9月首次在日本上市，是维生素B₁的脂溶性衍生物，改善了水溶性维生素B₁生物利用度低的缺点，提高了血液和组织中硫胺素的浓度，故用于治疗维生素B₁类缺乏症及代谢相关障碍，以及糖尿病相关并发症，如多发性神经疾病。苯磷硫胺作为维生素B₁补充剂已经在美国、日本、欧洲等世界各地广泛上市。最新研究显示，苯磷硫胺在治疗糖尿病并发症和老年痴呆领域显示较大潜力。

作为苯磷硫胺中间体，其分子式为C₁₂H₁₇N₄O₄PS，分子量为344.33，化学名为4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-膦酰氧基乙基)噻唑鎓，其结构式为：

该中间体的分析检测对反应控制和收率提高有着重要的作用，同时也直接影响着终产品的质量，所以建立一种操作简单、稳定有效的分析检测方法对苯磷硫胺中间体进行分析检测是非常必要的。

本品工艺合成过程中产生的杂质：

杂质1：氯化4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)噻唑鎓盐酸盐

杂质2：4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-氯乙基)噻唑鎓

杂质3：氯化4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-焦磷酰氧基)乙基噻唑鎓

杂质4：双(2-(4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-噻唑鎓基)乙基)磷酸酯

发明内容

发明目的：本发明要解决的技术问题是提供一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法。

技术方案：为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，包括如下步骤：

(1)配制供试品溶液、系统适用性溶液；

(2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为4.6mm×150mm，填料粒径为5μm，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速为1ml/min进行梯度洗脱；

所述梯度洗脱程序如下：

0-20min，流动相A的体积百分比由95％降至40％，流动相B的体积百分比由5％升至60％；

20-25min，流动相A的体积百分比为40％，流动相B的体积百分比为60％；