[发明专利]一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制供试品溶液、系统适用性溶液；

(2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为4.6mm×150mm，填料粒径为5μm，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速为1ml/min进行梯度洗脱；

所述梯度洗脱程序如下：

0-20min，流动相A的体积百分比由95％降至40％，流动相B的体积百分比由5％升至60％；

20-25min，流动相A的体积百分比为40％，流动相B的体积百分比为60％；

25-25.1min，流动相A的体积百分比由40％升至95％，流动相B体积百分比为60％降至5％；

25.1-35min，流动相A的体积百分比为95％，流动相B体积百分比为20％；

(3)分别吸取供试品溶液和系统适用性溶液，注入高效液相色谱仪，进行HPLC分析；

所述的中间体为4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-膦酰氧基乙基)噻唑鎓；

所述的有关物质包括：氯化4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)噻唑鎓盐酸盐、4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-氯乙基)噻唑鎓、氯化4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-焦磷酰氧基)乙基噻唑鎓、双(2-(4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-噻唑鎓基)乙基)磷酸酯。

2.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液的配制方法如下：取苯磷硫胺中间体供试品，制成1.0mg/ml的苯磷硫胺中间体供试品溶液；

所述系统适用性溶液的配制方法如下：取4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-膦酰氧基乙基)噻唑鎓及其有关物质，制成含取4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-膦酰氧基乙基)噻唑鎓浓度为1.0mg/ml、各有关物质浓度分别为2μg/ml的混合溶液。

3.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述庚烷磺酸钠溶液为庚烷磺酸钠含量为2.0g/L的水溶液，用磷酸调节pH至3.2。

4.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，色谱柱柱温35℃。

5.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱，检测波长244nm。

6.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，色谱柱进样量10μl。

7.根据权利要求1所述的苯磷硫胺中间体及其有关物质的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，采用峰面积归一化法计算苯磷硫胺中间体及其有关物质的含量。