[发明专利]一种在废羊毛提取角蛋白的方法在审
| 申请号: | 202011622640.8 | 申请日: | 2020-12-31 | 
| 公开(公告)号: | CN112724235A | 公开(公告)日: | 2021-04-30 | 
| 发明(设计)人: | 郭森明 | 申请(专利权)人: | 郭森明 | 
| 主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/14 | 
| 代理公司: | 泉州市宽胜知识产权代理事务所(普通合伙) 35229 | 代理人: | 廖秀玲 | 
| 地址: | 362000 福建省泉州市*** | 国省代码: | 福建;35 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 羊毛 提取 角蛋白 方法 | ||
1.一种在废羊毛提取角蛋白的方法,其特征在于:包括以下步骤;
A.将羊毛在0.1%的TWEEN20溶液中洗涤2h,而后用水冲洗,真空过滤在Whatman#2纸上;
B.浸泡在氯仿/甲醇混合物(2:1,v/v)中24h,并再次真空过滤在Whatman#2纸上过滤;
C.用正己烷在Soxhlet提取6h,提取后,进行风干,并在真空下保存,带溶剂蒸发至干燥,残余脂质称重;
D.在正己烷前后~0.5g羊毛样品上测定水分和灰分,在50℃下真空干燥48h,然后在除湿器中冷却并称重,并转移到瓷盘中,并加热搅拌2h,然后冷却并称重。
E.用氯仿萃取6MHCl水解的羊毛,用正己烷萃取测定羊毛的脂质,将含脂的提取溶剂转移到称重的洗涤皿中,在溶剂蒸发至干燥后重新称重;
F.对0.5g至2.0g批次提取的羊毛纤维进行初步增溶实验,比较采用1.0g样品进行氧化还原(不涉及尿素),通过真空过滤在定性滤纸上去除任何剩余的纤维后,初步步骤的增溶;
G.离心30分钟从而分离可溶性和不溶性并在6000-8000MWCO(分子量切断)油管中,用去离子水对离心后的上清液和固体组分进行透析,然后进行裂解;
H.羊毛纤维在37℃和180rpm条件下在2%过氧乙酸中氧化静制8h,然后用水过滤和洗涤;
I.用100mM的Tris碱(pH10.5)在37℃和180rpm下提取氧化纤维,用0.5MHCl调节到pH4,沉淀蛋白质,而后提取蛋白质。
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