[发明专利]消化道肿瘤标志物组合、检测试剂盒及其用途有效
申请号: | 202011620171.6 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112646891B | 公开(公告)日: | 2023-09-05 |
发明(设计)人: | 赵国栋;熊尚岷;王凯 | 申请(专利权)人: | 苏州唯善生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 刘妍妍 |
地址: | 215300 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 消化道 肿瘤 标志 组合 检测 试剂盒 及其 用途 | ||
1. 一种引物组在制备用于同时检测食管癌、胃癌和结直肠癌的试剂中的应用,其特征在于,所述引物组用于消化道肿瘤标志物扩增,所述的标志物基因包含甲基化的KCNQ5、C9orf50、CLIP4、ZNF582、TFPI2和ELMO1;甲基化的KCNQ5、C9orf50、CLIP4、ZNF582、TFPI2和ELMO1扩增的片段上包含至少一个CpG位点;所述甲基化的KCNQ5、C9orf50、CLIP4、ZNF582、TFPI2和ELMO1的序列分别如SEQ ID NO. 34 ~ SEQ ID NO. 39所示;所述标志物组合中还包含1个内参基因,所述的内参基因为ACTB;所述引物组序列如SEQ ID NO. 1~SEQ ID NO.33 所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,将样本经核酸提取纯化后,亚硫酸氢盐处理后,未甲基化胞嘧啶转换为尿嘧啶,采用KCNQ5、C9orf50、CLIP4、ZNF582、TFPI2和ELMO1进行甲基化特异性荧光定量PCR检测;当甲基化的KCNQ5、C9orf50、CLIP4、ZNF582、TFPI2和ELMO1任一基因反应为阳性,则该检测范围即判读为阳性。
3. 根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用还包含阳性外质控和阴性外质控,所述的阳性外质控为甲基化为全阳性的基因组序列,阴性外质控为去离子水、1xTEbuffer或 10mM Tris-HCl中的任意一种。
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