[发明专利]一种黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC-MS特征图谱及其构建方法和应用

说明书

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC‑MS特征图谱及其构建方法和应用。本发明提供的构建方法，以对照品、对照药材作为对照，以甲酸水溶液‑乙腈为流动相进行梯度洗脱，通过对色谱条件和质谱条件进行合理化控制，从而形成黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC‑MS特征图谱的全貌，使黑顺片的质量控制得到提升，可对黑顺片从饮片经标准汤剂再到配方颗粒成品的工艺过程中的内在品质进行把控，有利于整体评价黑顺片相关工艺过程的科学性、合理性，确保黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒整体质量的稳定性，从而保证黑顺片的临床疗效。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC-MS特征图谱，该特征图谱的构建方法，以及利用该特征图谱进行样品检测的应用。

背景技术

附子是毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaeli Debx.)的子根的加工品，根据加工方法的不同，可分为盐附子、黑顺片、白附子等，其中黑顺片为纵切片，上宽下窄，外皮黑褐色，切面暗黄色，性大热，味辛、甘，有毒，归心、肾、脾经，具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛之功效。

研究表明，附子中的主要成分是生物碱，《中国药典》(2015年版)一部中以苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱作为含量测定指标，但未对其进行特征图谱控制。有文献报道称，王晓雅等人基于指纹图谱和化学计量学对3个主产区(四川江油、四川布拖和云南)的35批黑顺片进行质量评价，结果表明来自不同产地的35批黑顺片样品指纹图谱的相似度均大于0.900(王晓雅,熊亮,蒙春旺,彭成等,基于指纹图谱盒化学计量法评价不同产地黑顺片的质量[J],中药新药与临床药理,2020,3:353-358)；孙凯等人研究了不同产地的黑顺片中的HPLC指纹图谱，并建立了测定黑顺片中次乌头碱、乌头碱、新乌头碱的HPLC分析方法(孙凯,李佳,张永清,黑顺片指纹图谱及有效成分含量测定[J],江西中医药,2012,43(10):58-61)；黄慧莲等人研究了四川江油、陕西汉中及云南丽江等附子主产区的黑顺片的高效液相色谱指纹图谱(黄慧莲,刘科兰,邵峰等,不同主产地黑顺片的指纹图谱研究[J],中国实验方剂学杂志,2011,17(16):44-49)；王超越等人建立了黑顺片中6种酯型生物碱含量的高效液相测定方法(王超群,翟宏焱,王晓华,RP-HPLC法测定黑顺片中6种酯型生物碱的含量[J],化学分析计量,2015,2:62-65)。

然而，上述报道仅针对黑顺片饮片进行了HPLC指纹图谱研究，或者采用RP-HPLC法建立了控制指标，还未见对黑顺片标准汤剂、配方颗粒特征图谱研究的报道，现有的检测方法难以有效对比和分析黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的差异与变化，难以深入认识黑顺片药效物质基础在从原料到配方颗粒成品的工艺过程中的传递情况，难以整体评价和控制从黑顺片饮片到配方颗粒成品的工艺过程。

因此，构建统一的黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱，并利用该特征图谱进行测定，有利于整体评价黑顺片相关工艺过程的科学性、合理性，更能整体控制黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒的内在质量，确保黑顺片的临床疗效。

发明内容

发明要解决的问题

本发明提供了一种黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC-MS特征图谱的构建方法，通过该方法构建的特征图谱能整体控制黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒中的特征成分。

用于解决问题的方案

第一方面，本发明提供一种黑顺片饮片、标准汤剂、配方颗粒UPLC-MS特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

1)制备黑顺片的饮片供试品溶液、标准汤剂供试品溶液和配方颗粒供试品溶液以及对照药材溶液和对照品溶液；