[发明专利]一种用于快速检测鸭2型腺病毒和鸭圆环病毒的双重PCR引物组及其检测方法与应用在审
| 申请号： | 202011594770.5 | 申请日： | 2020-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN112575122A | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 姬普雨;王新港;晋盈辉;李新;姬星宇;张先峰;周欣;李厚伟;丁丽萍 | 申请（专利权）人： | 商丘美兰生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 | 代理人： | 许艳敏 |
| 地址： | 476200 河南省商*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 快速 检测 病毒 圆环 双重 pcr 引物 及其 方法 应用 | ||
1.一种用于快速检测DAdV-2和DuCV的双重PCR引物组，其特征在于，所述的双重PCR引物组由用于检测DAdV-2的引物和用于检测DuCV的引物组成，
用于检测DAdV-2的引物的核苷酸序列为：
上游引物F1：5’-CGATGGAACGACAGTAAA-3’
下游引物R1：5’-AAACGAAAAAGCAAGAGC-3’
用于检测DuCV的引物的核苷酸序列为：
上游引物F2：5’-GTGGTGGGACGGTTACTCGG-3’
下游引物R2：5’-TTTATTGGGAACGGGAGGGT-3’。
2.权利要求1所述的引物组在制备检测DAdV-2和DuCV的试剂中的应用。
3.一种含有权利要求1所述的双重PCR引物组的试剂盒。
4.采用权利要求1所述的双重PCR引物组同时检测DAdV-2和DuCV的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)合成用于检测DAdV-2和DuCV的双重PCR引物组；
(2)提取待检测样品的总DNA，以提取的总DNA为模板，采用步骤(1)合成的双重PCR引物组进行PCR扩增反应；
(3)分析PCR扩增产物，进行结果判定。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述PCR扩增的反应体系为：上游引物F1、下游引物R1以及上游引物F2、下游引物R2各0.5μL，各引物的终浓度为0.4pmol/μL；2×Taq Master Mix酶12.5μL；DNA模板各1μL；灭菌后ddH2O补足至25μL；所述PCR扩增反应的条件为：95℃预变性5min；94℃90s，94℃20s，54℃30s，72℃20s，30个循环，最后一个循环72℃延伸5min。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述分析PCR扩增产物具体为对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，根据电泳结果确定样品中病毒的种类；样品中有DAdV-2时，扩增产物中会出现598bp的条带；样品中有DuCV时，扩增产物中会出现297bp的条带；样品中含有DAdV-2和DuCV混合感染时，扩增产物中会出现598bp和297bp两条条带。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于商丘美兰生物工程有限公司，未经商丘美兰生物工程有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011594770.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
