[发明专利]检测母乳中磷脂型多不饱和脂肪酸的方法

权利要求书

1.一种提取母乳中磷脂的方法，其特征在于，包括如下步骤：向待测母乳样品中加入含有甲酸的甲醇溶液进行萃取，萃取完全后取上清液，所述甲酸在甲醇溶液中的体积比含量为2～10％。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲酸在甲醇溶液中的体积比含量为4～8％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述待测母乳样品与所述含有甲酸的甲醇溶液的体积比为1:(10～40)，优选为1:(20～30)。

4.一种检测母乳中磷脂型多不饱和脂肪酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)向待测母乳样品中加入内标和含有甲酸的甲醇溶液进行萃取，萃取完全后取上清液；

2)使用固相萃取小柱分离所述上清液中的磷脂型多不饱和脂肪酸；

3)检测磷脂型多不饱和脂肪酸。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述待测母乳样品与所述含有甲酸的甲醇溶液的体积比为1:(10～40)；所述甲酸在甲醇溶液中的体积比含量为2～10％。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述待测母乳样品与所述内标的体积比为1:(0.01～0.05)。

7.根据权利要求4至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)的具体步骤为：

21)用甲醇活化固相萃取小柱；

22)将所述上清液转移至步骤21)中活化后的固相萃取小柱，使用含有甲酸的甲醇溶液和甲醇淋洗，使所述活化后的固相萃取小柱处于酸性环境；

23)使用含有氨水的甲醇溶液洗脱并收集磷脂。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤22)中，所述上清液的体积为固相萃取小柱内填料体积的1～2倍，流速不大于5mL/min，所述淋洗步骤中，含有甲酸的甲醇溶液和甲醇的体积比为1:1。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述步骤23)所述氨水在甲醇溶液中的体积比含量为20％。

10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中包括：

31)进行母乳中总脂肪酸组成测定，进行质谱MRM离子对确定；

32)采用液质色谱检测磷脂型脂肪酸含量。