[发明专利]一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针，其特征在于：所述荧光探针为硫量子点-MnO₂-L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐复合荧光探针；

所述硫量子点-MnO₂-L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐复合荧光探针通过以下步骤制得：

（1）硫量子点的合成：将硫粉、分散剂加入到碱性溶液中，制得混合液；超声反应，得硫纳米粒子溶液；将得到的硫纳米粒子溶液用透析袋除去杂质，得到黄色荧光硫量子点溶液；

（2）纳米MnO₂的合成：十二烷基硫酸钠溶液、硫酸加入超纯水混合均匀制得混合溶液，水浴反应；随后，加入高锰酸钾溶液，继续反应，得到MnO₂纳米片溶液；所合成的MnO₂纳米片经超纯水洗涤、过滤，冷冻干燥，得到MnO₂纳米片；

（3）配制L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐溶液：配制浓度为0.1 M/L的L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐水溶液，4℃条件下保存；

（4）将硫量子点、MnO₂纳米片和L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐加入缓冲溶液中，孵化，制得硫量子点- MnO₂-L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐复合荧光探针；

所述步骤（1）中分散剂为β-环糊精；

所述步骤（4）中硫量子点、MnO₂纳米片、L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐和缓冲溶液的体积比为1-2 : 2-2.5 : 2-5 : 100-500。

2.根据权利要求1所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针，其特征在于：

所述步骤（1）中硫粉为升华硫或硫磺粉中的一种；

所述步骤（1）中硫粉与分散剂的质量比为1.2-1.6 : 2.5-4.5；

所述步骤（1）中碱性溶液为氢氧化钠溶液，浓度为1-2 mol/L；

所述步骤（1）中超声反应时间为2-4 h。

3.根据权利要求2所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针，其特征在于：

所述步骤（2）混合溶液中十二烷基硫酸钠和硫酸浓度比为7-10 : 0.04-0.06；

所述步骤（2）中水浴反应温度为75-95℃，反应时间为10-30 min；

所述步骤（2）中高锰酸钾溶液的浓度为1-2 mmol/L。

4.根据权利要求3所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针，其特征在于：

所述步骤（4）中缓冲溶液为磷酸缓冲或Tris-HCl中的一种；

所述步骤（4）中缓冲溶液的pH为4-10。