[发明专利]肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白及应用

说明书

本发明公开一种肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白及应用。该亲和力成熟结合蛋白是氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示的aEP18E7结合蛋白；或是氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的aEP14E3结合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的aEP17D8结合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的aEP20C10结合蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的aEP24D10结合蛋白中的至少一种与氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示的aEP18E7结合蛋白组合形成的结合蛋白；其活性高，能在制备用于治疗EpCAM高表达为特征疾病的药物中进行应用。

技术领域

本发明属于亲和力成熟结合蛋白领域，特别涉及一种肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白及应用。

背景技术

研究表明，肿瘤细胞之间存在异质性，在肿瘤实体中肿瘤细胞可形成一个层次结构，该层次结构中有一群具有起始肿瘤能力的细胞，即为肿瘤干细胞。肿瘤干细胞理论认为肿瘤干细胞与普通肿瘤细胞类似，具有自我更新、无限增殖、多能性和耐药性等特点。目前治疗肿瘤的主要途径包括手术切除，放疗或者化疗，但这些方法均不能有效的杀死肿瘤干细胞。由于肿瘤干细胞具有起始肿瘤能力，利用基因工程技术，设计靶向肿瘤干细胞特异性生物标记分子，成为治疗癌症的另一个有效途径。

上皮细胞黏附分子(EpCAM)由314个氨基酸组成，包含三个结构域：胞外段结构域(EpEX)，单次跨膜结构域和胞内结构域(EpICD)。在一些正常组织和细胞中，如食道鳞状上皮，EpCAM蛋白表达水平较低，而在某些具有增殖能力的细胞中，如肝再生细胞，EpCAM的表达水平相对较高，在正常的胃粘膜中无EpCAM表达，但是在77％的胃癌患者胃粘膜中均发现EpCAM重新表达。另外，还有相当一部分组织在发生癌变时出现了EpCAM表达水平较正常组织高的情况，如胰腺、乳腺、卵巢、结肠、膀胱和前列腺等。这些研究表明，EpCAM可能在组织细胞恶性转化过程中发挥着一定的作用，且可能参与肿瘤发生发展相关的代谢过程。此外，还有研究表明，EpCAM蛋白胞外段缺失在肿瘤中经常发生，而这种情况与肿瘤的恶性程度相关。EpCAM蛋白参与肿瘤细胞增殖、形成、侵袭、迁移、诊断、药物抵抗和抗肿瘤治疗等过程，因此，以EpCAM作为肿瘤治疗的靶点，拥有广阔的应用前景，具有极高的医学价值。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白。

本发明的另一目的在于提供上述肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种肿瘤干细胞标志分子EpCAM的亲和力成熟结合蛋白，是aEP18E7亲和力成熟结合蛋白；或是aEP14E3亲和力成熟结合蛋白、aEP17D8亲和力成熟结合蛋白、aEP20C10亲和力成熟结合蛋白和aEP24D10亲和力成熟结合蛋白中的至少一种与aEP18E7亲和力成熟结合蛋白组合形成的结合蛋白；

所述的aEP14E3亲和力成熟结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述的aEP17D8亲和力成熟结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述的aEP18E7亲和力成熟结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述的aEP20C10亲和力成熟结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述的aEP24D10亲和力成熟结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。