[发明专利]新冠肺炎病毒分型及突变位点快速检测方法及试剂盒有效
申请号: | 202011554332.6 | 申请日: | 2020-12-24 |
公开(公告)号: | CN112481417B | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 杨秀清;徐现 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 郭海燕 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺炎 病毒 突变 快速 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种新冠肺炎病毒分型及突变位点快速检测的试剂盒,其特征在于:包括引物组和DNA片段,PCR缓冲液;
所述引物组包括:GC+C241T-F、C241T-R 、GC+C3037T-F、C3037T-R、GC+G11083T-F、G11083T-R、GC+C14408T-F、C14408T-R、GC+A23403G-F、A23403G-R、GC+G25563T-F、G25563T-R、GC+GGG28881AAC-F、GGG28881AAC-R,其序列依次如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14所示;
所述DNA片段包括突变后的DNA片段及对应的原始DNA片段,其中:突变后的DNA片段包括C241T片段、C3037T片段、G11083T片段、C14408T片段、A23403G片段、G25563T片段、GGG28881AAC片段,序列分别如SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21所示;对应的原始DNA片段包括C241片段、C3037片段、G11083片段、C14408片段、A23403片段、G25563片段、GGG28881片段,其序列分别如SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28所示;
所述PCR缓冲液包括:5µl 10×EasyTaq®Buffer,4µl 10mmol/L dNTPs,1µl 上游引物,1µl下游引物,1µl Taq酶,原始DNA片段与其突变后的DNA片段各1µl,37µl ddH2O,4µlForward GSP,4µl Reverse GSP,10µl 2×TS One-Step Reaction Mix,0.4µlTransScript®One-Step EnzymeSuperMix, 7µl RNase-free Water。
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