[发明专利]复合磷脂脂质体中mPEG2000-DSPE、DOPE和M5三种磷脂含量的检测方法在审
申请号: | 202011549984.0 | 申请日: | 2020-12-24 |
公开(公告)号: | CN114660188A | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 邱旭辉;李炜玮;孙宝来;赵国凤;张育坚;李航文 | 申请(专利权)人: | 斯微(上海)生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/64;G01N30/86 |
代理公司: | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人: | 程大军 |
地址: | 200120 上海市浦东新区中国(上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 复合 磷脂 脂质体 mpeg2000 dspe dope m5 含量 检测 方法 | ||
1.一种高效液相色谱同时检测mPEG2000-DSPE、DOPE和M5三种磷脂含量的方法,其特征在于,所述方法采用高效液相色谱-电雾式检测器检测,流动相A为10mM醋酸铵溶液,流动相B为甲醇,进行梯度洗脱。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的梯度洗脱程序为:
时间(min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 10 90 10 0 100 14 0 100 15 10 90 20 10 90
。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述的流动相A的配制方法为:称量醋酸铵7705mg到1L的溶剂瓶中,加入1000mL超纯水溶解超声15min;流动相B采用的甲醇为色谱级甲醇;所述的高效液相色谱条件为:色谱柱为C8色谱柱,流动相流速为1.0mL/min,柱温为35℃。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述的电雾式检测器检测条件为:蒸发温度35℃,Filter为3.6,Rate:5Hz。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括标准品制备,所述标准品制备包括mPEG2000-DSPE、DOPE和M5标准品的制备,主要步骤为:先分别用乙醇溶解或稀释mPEG2000-DSPE、DOPE或M5,等体积混合,再用甲醇稀释到7个系列浓度,分别如下表所示:
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括样品处理,所述样品处理主要步骤为:取100μL样品到离心管,加入100μL二次蒸馏水和200μL的2%Triton 100到离心管,混匀,室温下反应1小时。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的2%Triton 100的制备方法为:取20μLTriton 100加入到980μL二次蒸馏水中,37℃水浴中溶解,混匀。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于斯微(上海)生物科技股份有限公司,未经斯微(上海)生物科技股份有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011549984.0/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。