[发明专利]麦角甾醇联合阿法替尼脂质体的制备方法

说明书

本发明涉及一种麦角甾醇联合阿法替尼脂质体的制备方法，属于药物制剂技术领域。麦角甾醇联合阿法替尼脂质体的制备方法，包括以下步骤：称取卵磷脂SPC、胆固醇Chole、麦角甾醇ERG，用氯仿溶解后旋转蒸发成薄膜，水化后经探头超声和高压挤出，透析后加入阿法替尼Afa柠檬酸溶液在45~60℃下，孵育5~15 min，制备得到麦角甾醇联合阿法替尼脂质体ERG/Afa‑LIP。本发明在对第一代分子靶向药物吉非替尼与麦角甾醇联合应用的基础上，将Afa和ERG联合，共同载于脂质体中制备成双载药脂质体进行研究，优势在于：（1）可以通过协同作用或相加作用增强抗肿瘤作用；（2）可以共同递送至肿瘤部位与肿瘤细胞内发挥药效；（3）减少毒副作用的发生。

技术领域

本发明涉及一种脂质体的制备方法，尤其涉及一种麦角甾醇联合阿法替尼脂质体的制备方法，属于药物制剂技术领域。

背景技术

肺恶性肿瘤是当今世界非良性肿瘤相关死亡的主要原因，对人类健康构成严重威胁。《2018年全球癌症发病率和死亡率估计》报道，预计2018年将有1810万新癌症病例和960万癌症死亡病例，其中非小细胞肺癌（non -small cell lung cancer，NSCLC）约占肺癌的85%，但75%的患者发现时已处于癌症中晚期，错过了手术治疗的最佳时期。

由于顺铂、紫杉醇类药物较长时间投入临床应用，但并没有改善患者的生存效益，出现耐药性、毒副反应，甚至危害患者的健康和生命。分子靶向药物治疗以其针对性强，副作用少的特点，应用越来越广泛。2004年，研究发现，NSCLC与表皮生长因子受体（epidermalgrowth factor receptor, EGFR）突变有关，自此肺癌的治疗进入分子靶向研究的阶段。

吉非替尼（Gefitinib）是第一代表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor, TKI），对EGFR突变的患者疗效优于化疗药物，但是患者在用药10-14个月后出现TKI耐药现象，最终导致药物的疗效降低。相关研究表明这种TKI耐药主要是由于EGFR外显子的苏氨酸-790突变为蛋氨酸，亦称T790M突变，c-Met基因扩增等引起。在前期实验研究中，本实验室采用了针对第一代分子靶向药物吉非替尼敏感的PC-9细胞以及对其耐药的A549细胞进行体外机理的研究。研究发现，不同给药时间下联合给药组对A549，PC-9细胞的抑制率相较于麦角甾醇和吉非替尼两单用组均有不同程度的提高，表明麦角甾醇与吉非替尼联用明显增强了GEF对A549与PC-9细胞的敏感性。

阿法替尼（Afatinib）是第二代不可逆EGFR酪氨酸激酶抑制剂，是德国勃林格殷格翰公司研发的EGFR和HER2双重多靶点药物，即是针对TKI继发性耐药开发所研制的，它携带一个反应性的丙烯酰胺基，是ATP竞争苯胺基衍生物，能够阻止EGFR、HER2和HER4激酶，形成共价键和不可逆价键。然而第二代靶向药物阿法替尼使用约9-13个月后也会产生耐药，失去抗肿瘤作用，严重影响了治疗效果。

目前市售阿法替尼为片剂，口服给药生物利用度较低，且不良反应较多，最常见的是胃肠道的不良反应，不降反应较严重者需要采取中断给药或减少剂量的措施。为提高患者的生命质量，减小耐药现象的发生，使其更好的发挥药效，开发一种具有靶向性、生物利用度高、不良反应少的阿法替尼新型制剂势在必行。

考虑到药物的不同物理化学和药代动力学特性，如溶解度，半衰期等，简单的独立给药不能达到预期的效果。因此，需要药物共同递送系统来解决这些问题。

发明内容

本发明要解决上述问题，从而提供一种麦角甾醇联合阿法替尼脂质体的制备方法。脂质体是Afa与ERG的有效载体，所以选择脂质体作为药物递送系统。本发明在对第一代分子靶向药物吉非替尼与麦角甾醇联合应用的基础上，为了能够针对肺癌有进一步的研究，考虑将Afa和ERG联合，共同载于脂质体中制备成双载药脂质体进行研究，优势在于：（1）可以通过协同作用或相加作用增强抗肿瘤作用；（2）可以共同递送至肿瘤部位与肿瘤细胞内发挥药效；（3）减少毒副作用的发生。