[发明专利]一种UPLC-MS/MS检测对氨基苯酚类物质的方法

说明书

本发明提供了一种UPLC‑MS/MS检测对氨基苯酚类物质的方法；包括以下步骤：a、确定UPLC‑MS/MS条件；b、采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用法(UPLC‑MS/MS)分别对对照品溶液、供试品溶液进行检测；c、按外标法以峰面积计算得到样品中的杂质含量。本发明提供了一种检测对氨基苯酚类物质的新检测方法，各待测物相互之间无干扰，灵敏度高，可以同时实现对4‑氨基‑3‑氟苯酚和4‑氨基苯酚的准确检测，为监控对氨基苯酚类物质的含量提供了一种行之有效的检测方法。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种UPLC-MS/MS检测对氨基苯酚类物质的方法。

背景技术

4-[4-({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酰}氨基)-3-氟苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺一水合物是一种新型口服多激酶抑制剂，用于转移性结直肠癌(CRC)、胃肠道间质瘤(GIST)及肝细胞癌(HCC)患者的治疗。该药已在美国、欧盟、日本等90多个国家和地区批准使用，于2017年3月24日获CFDA批准上市许可，用于转移性结直肠癌和胃肠道间质瘤患者的治疗。该药物最大日剂量为160mg，基因毒性杂质4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚需要控制在9ppm以下。

张立庆等在《分析化学》2003年1月第31卷第1期128页《反相高效液相色谱同时测定对乙酰氨基酚等5组分的含量》一文中提到通过液相检测分离对乙酰氨基酚、扑尔敏、咖啡因、愈创木酚甘油醚和对氨基酚这5种物质，但是该液相方法不能将4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚分离开，检测限没法达到基因毒性杂质4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚需要控制在9ppm以下的要求。

而且4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚化合物保留较弱，易产生溶剂效应而导致峰分叉，从而影响检测的准确性。为了更好的控制产品质量，需要开发一种新的灵敏度及准确度较高的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种UPLC-MS/MS检测对氨基苯酚类物质的方法。使用该检测方法，待测物质相互之间无干扰，可以实现对待测物质4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚的准确检测。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明涉及一种UPLC-MS/MS检测对氨基苯酚类物质的方法，所述对氨基苯酚类物质包括4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚中的任意一种或者两种；所述方法包括如下步骤：

S1、确定超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用法(UPLC-MS/MS)条件：

1)UPLC条件

色谱柱：固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；

流动相A：含0.1％甲酸的超纯水(即甲酸和水体积比为0.1:100的超纯水溶液)

流动相B：乙腈和甲醇体积比为(90-95)：(5-10)

梯度条件：按梯度洗脱

流速：0.27-0.33ml/min

2)MS/MS条件

离子源：大气压电喷雾离子源(ESI)

干燥气温度:300℃；干燥气流速:8L/min；鞘气温度：300℃；

鞘气流速:11L/min；雾化气压力：45psi；毛细管电压：4000V；喷嘴电压：500V。

S2、标准溶液配制：分别取4-氨基-3-氟苯酚和4-氨基苯酚对照品溶于含有甲酸的甲醇中，制成标准液，以上述UPLC-MS/MS条件分别检测所述标准液；

S3、取待检样品，溶于含有甲酸的甲醇中，制成样品溶液，以上述UPLC-MS/MS条件检测所述样品溶液；