[发明专利]一种蛋白复合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种重组蛋白、含该重组蛋白的蛋白复合物和应用。本发明重组蛋白由人源白介素1受体拮抗剂蛋白与含有VPGKG重复单元的蛋白组成，可用于包括类风湿性关节炎、急性痛风性关节炎及其它存在白介素1(interleukin，IL‑1)增多的风湿免疫病、遗传性疾病及肿瘤的辅助治疗，疗效显著。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种蛋白复合物及其制备方法和应用。

背景技术

类风湿性关节炎是一种人类免疫性疾病，目前对于该疾病病因的探索还处于初级阶段。除患者本身遗传因素，感染、免疫系统异常、环境因素(如接触二氧化硅、感染因子、体内维生素D缺乏)、不良生活习惯(如吸烟、肥胖)、体内微生物群改变等多中因素均会导致该疾病风险升高。患有类风湿性关节炎的患者，其罹患高血压、糖尿病、高脂血症和肥胖症的发病率分别为18.6％、6.0％、9.9％和4.4％，这些继发的心血管疾病是导致患者过早死亡的常见原因。由于在发病早期病情对患者影响不大，且反复给药患者依从性差，多数患者易主动暂停或终止治疗过程，使得病情进一步加深。在发病中后期，患者四肢关节、肘、肩、颈椎、髋、膝等关节处出现明显的关节炎症，关节腔积液挤入关节后侧形成腘窝囊肿、导致肢端无力甚至难以回复到正常位置，最终出现关节、肢端畸形。晚期类风湿性关节炎症状无法通过药物治疗改善，只能通过关节置换外科手术疗法调整患者关节功能，改善生活质量；但此时接受治疗的人群多集中于中老年群体，手术风险高，治疗花销高昂。由于类风湿性关节炎发病机制尚不明确，诱因复杂。所以临床用一线药物主要通过消炎、止痛、解热为主，从而缓解患者的不适感，主要为非甾类抗炎药和糖皮质激素类。此类药物价格低廉，长期使用会导致肝肾、胃肠道损伤等副作用，且反复用药疗效会降低。另外，疾病修饰类抗类风湿药可明显缓解关节炎症和急性，但起效缓慢，其对患者带来的代谢压力和心理负担相对较高。

痛风的发病症状与类风湿类似。由于灵长类动物存在嘌呤代谢酶缺陷，随着高嘌呤食物摄入增多和排泄异常，体内尿酸增多并在关节处聚集形成单钠尿酸盐晶体(痛风石)，从而引发炎症。痛风发病过程可分为无症状高尿酸血症期、急性期、间歇期、慢性期。患者从无症状的高尿酸血症转入急性期后，开始出现疲乏、全身不适和关节刺痛等反应；痛风发作时会导致患者因关节剧烈疼痛从深夜惊醒，在12小时后发展为撕裂样、刀割样或咬噬样痛感，难以忍受。发作关节及其周围组织会出现红、肿、热、痛和功能受限。在间歇期，痛风发作后数天或数周可以自行缓解，一般无明显后遗症；但在数月或数年复发后，发病频率逐渐升高、持续时间持续延长，受累关节范围扩大至指、腕、肘甚至、髋、骶髂、胸锁或脊柱关节。痛风发作10年左右进入慢性痛风石病变期。此时患者皮下、关节滑膜、软骨、骨质及关节周围软组织处沉积有大量单钠尿酸盐晶体，在关节活动时，这些尿酸盐结晶摩擦关节滑膜、软骨等组织，导致关节处组织磨损、发炎、关节骨质出现破坏，患者关节处持续肿痛、甚至出现畸形和功能障碍，严重影响患者的生存活动和生活质量。当前痛风治疗一线用药包括别嘌醇类和非布司他，以及促尿酸排泄药物苯溴马隆；二线用药包括秋水仙碱等。这些药物在部分人群中无明显治疗效果，且容易复发、存在严重肝肾毒性。

类风湿性关节炎和痛风发作过程中，关节处的白介素1(IL-1)含量明显升高，并进一步引发局部的炎症反应，导致组织肿胀、炎症细胞浸润以及软骨损伤。通过白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)抑制IL-1受体与IL-1的结合，可快速抑制IL-1导致的炎症反应，有效减缓病情发展。目前，人源白介素1受体拮抗剂(阿那白滞素)已成功应用于类风湿性关节炎和急性痛风性关节炎的治疗中，但由于其在体内半衰期短，患者需要反复给药达到治疗效果，而且价格昂贵。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种重组蛋白及其制备方法和应用，该复合物包括人源IL-1RA蛋白和含VPGKG重复序列的蛋白，可用于包括类风湿性关节炎、急性痛风性关节炎及其它以白介素1(interleukin-1，IL-1)异常增高为显著特点的风湿免疫病、遗传性疾病及肿瘤的辅助治疗，疗效显著。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：