[发明专利]一种蛋白复合物及其制备方法和应用在审

申请号：	202011521081.1	申请日：	2020-12-21
公开（公告）号：	CN112521514A	公开（公告）日：	2021-03-19
发明（设计）人：	刘凯;张洪杰	申请（专利权）人：	清华大学
主分类号：	C07K19/00	分类号：	C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K38/17;A61K47/64;A61K45/06;A61P29/00;A61P19/02;A61P19/06;A61P37/02;A61P35/00
代理公司：	北京集佳知识产权代理有限公司 11227	代理人：	王欢
地址：	10008***	国省代码：	北京;11
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摘要：
搜索关键词：	一种蛋白复合物及其制备方法应用
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【权利要求书】：

1.重组蛋白，包括人源IL-1RA蛋白和含(VPGKG)重复序列的蛋白。

2.根据权利要求1所述的重组蛋白其特征在于，所述人源IL-1RA蛋白和含VPGKG重复序列的蛋白通过肽键直接相连或通过连接肽相连。

3.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述人源IL-1RA蛋白具有如SEQ IDNO.1～SEQ ID NO.4所示的任意一种氨基酸序列；或具有与SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示序列功能相同或相似的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述含(VPGKG)重复序列的蛋白由n个重复单元(VPGKG)和m个重复单元(VPGXG)组成；其中，X为任意一种天然氨基酸，m、n为大于零的整数；优选地，m为0～20之间的整数，n为1～150之间的整数；重复单元(VPGKG)和(VPGXG)随意组合；优选地，X为缬氨酸、丙氨酸或甘氨酸。

5.根据权利要求2所述的重组蛋白，其特征在于，所述连接肽由多个连续的任意氨基酸氨基组成。

6.根据权利要求1～5任一项所述的重组蛋白，其特征在于，具有SEQ ID NO.13～SEQID NO.72所示的任意一种氨基酸序列，或具有与SEQ ID NO.13～SEQ ID NO.72所示的任一序列至少80％同一性的氨基酸序列，或具有与SEQ ID NO.13～SEQ ID NO.72所示的任一序列功能相同或相似的氨基酸序列。

7.编码权利要求1～6任一项所述重组蛋白的核酸，其特征在于，具有：

SEQ ID NO.73～SEQ ID NO.132所示的任意一种核苷酸序列；或

与SEQ ID NO.73～SEQ ID NO.132所示序列至少有80％同一性的核苷酸序列；或

与SEQ ID NO.73～SEQ ID NO.132所示序列编码相同蛋白，但因遗传密码的简并性而与SEQ ID NO.73～SEQ ID NO.132所示序列不同的核苷酸序列。

8.权利要求1～6任一项所述的重组蛋白的制备方法，其特征在于：

(1)构建权利要求7所述核酸的表达载体；

(2)将权利要求7所述核酸表达载体转化或转染入宿主细胞；

(3)培养宿主细胞，诱导权利要求7所述重组蛋白的表达。

9.蛋白复合物，包含权利要求1～6任一项所述的重组蛋白和聚乙二醇。

10.根据权利要求9所述的蛋白复合物，其特征在于，所述重组蛋白与聚乙二醇的摩尔比为1:0.25n～1:5n。

11.蛋白复合物，包含权利要求1～6任一项所述的重组蛋白和硫酸软骨素(chondroitin sulfate，CS)。

12.根据权利要求11所述的蛋白复合物，其特征在于，所述重组蛋白与硫酸软骨素的摩尔比为1:0.25n～1:5n。