[发明专利]一种检测临床研究血浆样品中法匹拉韦浓度的方法在审
| 申请号： | 202011502416.5 | 申请日： | 2020-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN112730653A | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 杨勇;陈云辉;钟勘;姜金方;周茂金 | 申请（专利权）人： | 苏州海科医药技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人： | 刘洪勋 |
| 地址： | 215000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 临床 研究 血浆 样品 中法 匹拉韦 浓度 方法 | ||
1.一种检测临床研究血浆样品中法匹拉韦浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：血浆样品前处理，在1.5mL离心管中加入血浆样品，内标溶液，加入甲醇，涡流振荡，离心，取出上清转移至96孔板中，进行LC-MS/MS分析；
步骤2：色谱分离；
色谱条件，色谱柱：Eclipse Plus C18柱，3.5μm，100×4.6mm；进样量：1μL；柱温：40℃；流动相A相选用10mM甲酸铵水溶液含0.3％，流动相B项为甲醇，采用体积比为48：52的A：B相等度洗脱；自动进样器温度为4℃，流动相的流速为：0.65mL/min；
步骤3：质谱检测；
质谱条件：电喷雾电离源；电压为-4500V；离子源温度为500℃；Curtain Gas和CID压力分别为40和9psi；扫描模式为-MRM；监测离子反应分别为：法匹拉韦，m/z 156→m/z 113；法匹拉韦-15N3，m/z 159→m/z 115；CE为-23eV；DP为-60V；扫描时间为200ms。
2.根据权利要求1所述的一种超高灵敏的检测人血浆中法匹拉韦浓度的方法，其特征在于：步骤1血浆样品前处理，取50.0μL血浆样品，分别加入50.0μL内标工作液、200μL甲醇，涡流10min，以4500rpm转速离心10min，取出上清200μL转移至96孔板中，取1.00μL进行LC-MS/MS分析。
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