[发明专利]玉米转录因子ZmGBF1基因及其表达载体和应用

权利要求书

1.玉米转录因子ZmGBF1基因在提高玉米抗干旱和耐盐性中的应用，其特征在于：将ZmGBF1基因在玉米中过表达，在干旱胁迫和盐胁迫条件下提高玉米发芽能力、根系发育和花粉活力；所述ZmGBF1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，位于第7染色体，含有2个外显子和1个内含子；该基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，该蛋白含有bZIP-plant-G-box结合因子结构域、N末端富含脯氨酸的结构域和钙依赖蛋白激酶的结合位点，具有转录激活活性且属于核蛋白。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：在散粉期干旱胁迫条件下，花粉仍能保持较高的发育，提高后期籽粒结实率。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述应用通过构建玉米转录因子ZmGBF1基因的融合表达载体或过表达载体，然后转入玉米植株中实现。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述融合表达载体的制备步骤如下：

（1）以玉米总RNA反转录得到的cDNA为模板，以ZmGBF1-F和ZmGBF1-R为引物对进行扩增目的片段并回收；其中引物ZmGBF1-F的序列如SEQ ID No.3所示、ZmGBF1-R的序列如SEQ IDNo.4所示；

（2）以步骤（1）的目的片段作为模板，分别以ZmGBF1-F-SpeI和ZmGBF1-R-AscI、ZmGBF1-F-ECORI和ZmGBF1-R-BamHI、ZmGBF1-F-AscI和ZmGBF1-R-BamHI，作为特异性引物对，进行扩增；其中ZmGBF1-F-SpeI的序列如SEQ ID No.5所示、ZmGBF1-R-AscI的序列如SEQ ID No.6所示、ZmGBF1-F-ECORI的序列如SEQ ID No.7所示、ZmGBF1-R-BamHI的序列如SEQ ID No.8所示、ZmGBF1-F-AscI的序列如SEQ ID No.9所示；

（3）步骤（2）的三个扩增产物经双酶切后用T4连接酶过夜连接并转化，挑取验证正确的阳性克隆即为玉米转录因子ZmGBF1基因的融合表达载体ZmGBF1-pMDC83-GFP。