[发明专利]一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA联合检测试剂盒以及检测方法

说明书

本发明涉及病毒检测技术领域，尤其涉及一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA联合检测试剂盒以及检测方法。本发明公开了一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA的联合检测试剂盒，该试剂盒以包被有所述新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的多肽或其片段的珠子作为抗原珠，引入包被有牛血清蛋白的珠子作为包被有所述新型冠状病毒SARS‑CoV‑2抗原的珠子的对照，通过比较抗原珠与对照珠的荧光信号比率，可以确定SARS‑CoV‑2的人IgG，IgA和IgM抗体的真实信号。采用该试剂盒检测SARS‑CoV‑2的假阳性率极低。

技术领域

本发明涉及病毒检测技术领域，尤其涉及一种新型冠状病毒IgM、IgG 和IgA联合检测试剂盒以及检测方法。本申请要求2020年9月29日提交的 美国专利(专利申请号为US17/036,042)的权益，在此将上述申请的内容引 用并入本文。

背景技术

人类感染SARS-CoV-2可能会导致严重的肺炎，并伴有大量炎性细胞因 子的产生(“细胞因子风暴”)。与病毒有关的疾病具有典型的肺炎症状，并伴 有其他一些症状，例如肌肉疼痛，头痛和喉咙痛等，通常被称为 COVID-19。

目前，尚无针对COVID-19感染的有效治疗方法。因此，预后很大程度 上取决于宿主免疫系统的功效。已经开发出针对病毒特异性IgM和IgG抗体 的早期诊断试剂盒，或检测病毒水平的qRT-PCR试剂盒，但某些患者血清中 高水平的免疫球蛋白引起的假阳性结果的高百分比也已成为血清抗病毒免疫 球蛋白(Ig)检测的挑战。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA联合检测试 剂盒以及检测方法，该联合检测试剂盒可检测SARS-CoV-2的人IgG，IgA和 IgM抗体的真实信号，采用该试剂盒检测的假阳性结果极低。

其技术方案如下：

本发明提供了一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA的联合检测试剂盒，包 括：包被有新型冠状病毒SARS-CoV-2抗原的珠子、包被有牛血清白蛋白的 珠子和荧光素标记的抗体或其抗原的结合片段；

所述SARS-CoV-2抗原为SARS-CoV-2的多肽或其片段；

所述抗体为抗人IgG抗体，抗人IgA抗体和抗人IgM抗体。

所述珠子至少为两种荧光强度不同的珠子，珠子的荧光强度的不同使它 们可以彼此分开。

本发明提供的新型冠状病毒IgM、IgG和IgA的联合检测试剂盒，该试剂 盒引入包被有牛血清蛋白的珠子作为包被有所述新型冠状病毒SARS-CoV-2 抗原的珠子的对照，通过比较两组珠子的荧光信号比率，可以确定 SARS-CoV-2的人IgG，IgA和IgM抗体的真实信号。采用该试剂盒检测 SARS-CoV-2的假阳性率极低。

本发明试剂盒中，所述SARS-CoV-2的蛋白或其片段为SARS-CoV-2刺 突蛋白或其片段以及SARS-CoV-2核衣壳蛋白或其片段中的至少一种，优选 为SARS-CoV-2刺突蛋白或其片段。SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)的氨基 酸序列如SEQ ID NO：1所示(GenBank登录号：QHD43416)，其中，氨基 酸V16-Q690是减去前导序列的序列。SARS-CoV-2刺突蛋白或其片段优选包 含受体结合结构域(RBD)的片段，例如：包括但不限于SEQ ID NO：1氨 基酸R319-F541(SEQ ID NO：2)或之具有亲和力的抗原性片段，并与抗 SARS-CoV-2特异性抗体结合的片段。可通过本领域技术人员熟知的方法获 得SARS-CoV-2抗体的抗原片段SEQ ID NO：2，并确认其与抗SARS-CoV-2 抗体结合。