[发明专利]一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA联合检测试剂盒以及检测方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒IgM、IgG和IgA的联合检测试剂盒，其特征在于，包括：

包被有新型冠状病毒SARS-CoV-2抗原的珠子、包被有牛血清白蛋白的珠子和荧光素标记的抗体或其抗原的结合片段；

所述SARS-CoV-2抗原为SARS-CoV-2的蛋白或其片段；

所述抗体为抗人IgG抗体，抗人IgA抗体和抗人IgM抗体；

所述珠子至少为两种荧光强度不同的珠子。

2.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述SARS-CoV-2的蛋白或其片段为SARS-CoV-2刺突蛋白或其片段以及SARS-CoV-2核衣壳蛋白或其片段中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述SARS-CoV-2抗原为SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合结构域(RBD)的氨基酸Arg319至Phe541，其氨基酸序列如SEQ IDNO：2所示。

4.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述珠子为荧光强度不同且尺寸不同的珠子。

5.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述珠子为红色荧光珠或蓝色荧光珠。

6.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述荧光素选自异硫氰酸荧光素、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7、Cy7.5、Texas Red、Alexa Fluor、HILYTETM Fluor、DYLITETM Fluor、RayBright.RTM V450、RayBright.RTMB488或红色荧光蛋白。

7.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述抗人IgG抗体与RayBright.RTM V450偶联，所述抗人IgA抗体与RayBright.RTMB488偶联，所述抗人IgM抗体与R-PE偶联。

8.根据权利要求1所述的联合检测试剂盒，其特征在于，还包括洗涤缓冲液和分析稀释液；

所述洗涤缓冲液为含0.1％吐温-20的PBS溶液；

所述分析稀释液为PBS溶液。

9.一种联合检测生物样本中新型冠状病毒IgM、IgG和IgA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将权利要求1至8任意一项所述的联合检测试剂盒中的每一个包被有所述新型冠状病毒SARS-CoV-2抗原的珠子与待测样品进行孵育；

步骤2：将每一个包被有所述牛血清白蛋白的珠子分别与待测样品进行孵育；

步骤3：合并步骤1和步骤2所述孵育后的珠子，加入荧光素标记的抗体或其抗原的结合片段进行孵育，获得的偶联物分别记为抗原珠和对照珠；

步骤4：分别测定每一个抗原珠和每一个对照珠的表面每种荧光素的荧光强度，并计算每种抗原珠和每种对照珠的平均荧光强度，再计算同种抗原珠和对照珠平均荧光强度的比率；

当一种所述抗原珠表面一种荧光素的平均荧光强度≥200，且所述比率≥1.5时，判断所述待测样品中存在SARS-CoV-2；

当一种所述抗原珠表面一种荧光素的平均荧光强度＜200，且所述比率≤1时，判断所述待测样品中不存在SARS-CoV-2。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤1中所述待测样品为血清或血浆；

步骤1中每一个所述珠子位于一个单独体积的容器中。