[发明专利]一种压力多孔阀芯片及其检测方法

权利要求书

1.一种压力多孔阀芯片检测方法，其特征在于，检测使用的压力多孔阀芯片包括基底片和可升降的压力阀体，所述基底片上侧紧密贴合有通道片，所述通道片上开有上安装孔，基底片上开有与上安装孔对应的下安装孔，所述通道片朝下的一端排布有若干分别与上安装孔连通的微流体支路通道，所述微流体支路通道远离上安装孔一端的通道片上排布有六个储液槽，所述通道片上开有若干与储液槽一一对应的进液孔，进液孔与对应的储液槽连通，所述压力阀体依次穿过上安装孔和下安装孔分别与通道片和基底片连接，所述压力阀体的外周上开有若干与微流体支路通道一一对应的流体通孔，若干流体通孔在高度方向上间隔设置，所述流体通孔可覆盖对应的微流体支路通道所在区域，通道片朝下的一端开有流通区、微流体主通道一和负压接口，所述流体通孔的一端覆盖对应的微流体支路通道时，流体通孔的另一端与流通区连通，所述流通区远离流体通孔的一端经微流体主通道一与负压接口连通，从下往上顺时针方向看各个储液槽分别为储液槽一、储液槽二、储液槽三、储液槽四、储液槽五和储液槽六，压力阀体的高度方向上排布有8个流体通孔，从下往上看，8个流体通孔分别为流体通孔一、流体通孔二、流体通孔三、流体通孔四、流体通孔五、流体通孔六、流体通孔七和流体通孔八，流体通孔一的一端可覆盖与储液槽一连通的微流体支路通道，流体通孔二的一端可覆盖与储液槽二连通的微流体支路通道，流体通孔三、流体通孔五和流体通孔七的一端可覆盖与储液槽三连通的微流体支路通道，流体通孔四的一端可覆盖与储液槽四连通的微流体支路通道，流体通孔六的一端可覆盖与储液槽五连通的微流体支路通道，流体通孔八的一端可覆盖与储液槽六连通的微流体支路通道，基底片朝上的一端从流通区往负压接口所在方向依次开有在长度方向上间隔设置的缓冲槽和废液槽；

包括以下步骤：

（1）经各个进液孔分别往对应的储液槽内加入样本，将芯片放入配套检测设备中，蠕动泵工作，储液槽一内的样本在蠕动泵的驱动下，依次穿过微流体支路通道、流体通孔一、流通区、微流体主通道一进入支流反应通道，当样本开始进入缓冲槽时，蠕动泵停止动作，停滞15分钟，封闭抗原抗体图案片上三条捕获抗体条带的空余位点，防止非特异性吸附，封闭15分钟后，蠕动泵气动，吸出样本，进入废液槽或缓冲槽内，蠕动泵停止动作；

（2）驱动压力阀体按下设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔二与储液槽二连通，蠕动泵启动，储液槽二里的检测样本在蠕动泵的驱动下进入支流反应通道与捕获抗体发生特异性免疫反应，当检测样本开始进入缓冲槽时，蠕动泵停止动作，静止反应20分钟后，蠕动泵启动，吸出检测样本，检测样本进入废液槽或缓冲槽内，蠕动泵停止动作；

（3）驱动压力阀体继续下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔三与储液槽三连通，启动蠕动泵，储液槽三内的洗液在蠕动泵的驱动下洗涤微流体主通道一和未发生免疫反应的抗原抗体，待洗液全部吸入缓冲槽或废液槽内时，蠕动泵停止动作；

（4）驱动压力阀体下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔四与储液槽四连通，启动蠕动泵，储液槽四内的检测抗体在蠕动泵的驱动下，依次穿过流体通孔四和微流体主通道一进入支流反应通道与检测样本发生特异性免疫反应，当检测抗体开始进入缓冲槽时，蠕动泵停止动作，静止反应20分钟后，蠕动泵启动，检测抗体完全进入缓冲槽或废液槽内时，蠕动泵停止动作；

（5）驱动压力阀体继续下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔五与储液槽三连通，启动蠕动泵，储液槽三内的洗液在蠕动泵的启动下流入各个通道，洗涤各个通道和未发生免疫反应的抗原抗体，待洗液全部吸入缓冲槽或废液槽内时，蠕动泵停止动作；

（6）驱动压力阀体下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔六与储液槽五连通，启动蠕动泵，储液槽五里的链霉亲和素在蠕动泵的驱动下依次穿过流体通孔六、流通区和微流体主通道一进入支流反应通道，在支流反应通道发生生物素-链霉亲和素反应，蠕动泵停止动作，静止反应20分钟，蠕动泵启动，吸出链霉亲和素，进入缓冲槽或废液槽，蠕动泵停止工作；

（7）驱动压力阀体继续下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔七与储液槽三连通，启动蠕动泵，储液槽三内的洗液在蠕动泵的启动下流入各个通道，洗涤各个通道和未发生免疫反应的抗原抗体，待洗液全部吸入缓冲槽或废液槽内时，蠕动泵停止动作；

（8）驱动压力阀体再次下压设定距离后，压力阀体停止下降，流体通孔八与储液槽六连通，启动蠕动泵，储液槽六内的化学发光底物在蠕动泵的驱动下，依次穿过流体通孔八、流通区和微流体主通道一进入支流反应通道，在支流反应通道发生化学发光反应，蠕动泵停止动作，完成所有加样和反应后，芯片在全自动化学发光成像仪下拍摄，曝光时间15s，结束检测工作。