[发明专利]一种2A肽、双顺反子表达载体、重组蛋白表达系统及应用在审
| 申请号: | 202011476275.4 | 申请日: | 2020-12-14 |
| 公开(公告)号: | CN112592388A | 公开(公告)日: | 2021-04-02 |
| 发明(设计)人: | 王天云;林艳;张俊河;张继红;樊振林;米春柳;杨献军 | 申请(专利权)人: | 河南普诺易生物制品研究院有限公司;新乡医学院 |
| 主分类号: | C07K14/09 | 分类号: | C07K14/09;C07K14/095;C12N15/85;C07K16/24 |
| 代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
| 地址: | 453000 河南省新乡市新飞大道178*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 顺反子 表达 载体 重组 蛋白 系统 应用 | ||
1.一种2A肽,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的2A肽,其特征在于,所述2A肽的编码基因的核苷酸序列如SEQID NO:2或SEQ ID NO:4所示。
3.一种双顺反子表达载体,其特征在于,包含如权利要求1或2所述的2A肽的编码基因。
4.如权利要求1或2所述的2A肽、如权利要求3所述的双顺反子表达载体在提高重组蛋白表达水平方面的应用,其特征在于,所述重组蛋白通过哺乳动物重组蛋白表达系统制备而成。
5.构建如权利要求3所述的双顺反子表达载体的方法,其特征在于,包括将SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示基因序列插入出发载体的多克隆位点,获得重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述出发载体为pIRES-neo、pIRES-neo2、pIRES-neo3、pRC/CMV、pEE6.4、pEE12.4、pEGFP-C1、pcDNA 3.1中的任意一种。
7.一种重组蛋白表达系统,其特征在于,通过将目的基因克隆到如权利要求3所述的双顺反子表达载体,转染宿主细胞构建而成。
8.根据权利要求7所述的重组蛋白表达系统,其特征在于,所述目的基因来自人、其他哺乳动物、植物、昆虫或微生物。
9.根据权利要求8所述的重组蛋白表达系统,其特征在于,所述宿主细胞为CHO、HEK293、BHK或C127中的任意一种。
10.如权利要求7-9任一项所述的重组蛋白表达系统在制备目的蛋白方面的应用。
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