[发明专利]一种靶向肿瘤干细胞标志物CD133的订书肽及其应用

说明书

本发明涉及一种靶向肿瘤干细胞标志物CD133的订书肽及其应用，属于生物医学检测和药物化学领域。将多肽氨基酸序列SKDEEX₁X₂X₃X₄X₅X₆X₇X₈X₉X₁₀X₁₁X₁₂X₁₃X₁₄X₁₅订书，所得订书肽包含两个非天然氨基酸X，所述两个非天然氨基酸X通过形成大环的接头在i和i+n(n＝3，4，5，6，7，8，9)位置交联。本发明所述的订书肽可发生CD133肿瘤干细胞标志物原位诱导自组装。本发明所述的订书肽在一定程度上其α‑螺旋构象更稳定，自组装能力更强，血浆稳定性大大增强。本发明所述订书肽能对CD133阳性细胞起到靶向作用，可以作为靶向材料特异性靶向癌细胞。

技术领域

本发明涉及一种靶向肿瘤干细胞标志物CD133的订书肽及其应用，特别涉及肿瘤干细胞标志物CD133特异性靶向多肽筛选与全碳链订书，及其作为药物载体的应用，属于生物医学检测和药物化学领域。

背景技术

近年来，恶性肿瘤已成为危害人类健康的重要疾病，其发病率和死亡率逐年上升。现在对于多数恶性肿瘤，采用手术、放疗与化疗、靶向和免疫治疗等方法能够杀灭大部分肿瘤细胞，但绝大多数肿瘤仍无法获得根治，容易复发和转移。2001年，肿瘤干细胞(Cancerstem cell，CSC)这一概念被正式提出。肿瘤干细胞是肿瘤组织中存在的极少量(1％)具有自我更新、无限增殖能力及多向分化潜能的细胞，是肿瘤发生、发展、侵袭、转移的根源。因此，消除CSCs是成功根除肿瘤所必需的。CSC的无创成像方法可能对肿瘤诊断和治疗监测产生深远的影响。然而，由于缺乏检测，定位和非侵入性的量化检测技术，阻碍了CSC在临床患者中的调查研究。具体来说，还没有报道用临床相关的成像探针(例如，结合CSC特异性细胞表面蛋白的抗体或其他配体)对CSC成功进行非侵入性的成像操作。因此，当前的工作应着重于发展多种测定方法对尽可能多的CSC进行有效分析，并对其进行靶向治疗，这对目前肿瘤的诊断、预防和治疗可能会具有重要的意义。寻找特异性的表面标记物，通过其分选肿瘤干细胞，是进一步研究肿瘤发生、转移、复发和预后的关键。

CD133是人类干/祖细胞膜上发现的一种跨膜糖蛋白抗原，常表达于神经原始细胞、上皮/内皮祖细胞谱系、造血干/祖细胞等，是目前用来标记或分选干/祖细胞的最常用的膜表面标志物。越来越多的证据表明CD133已经成为众多肿瘤干细胞表面的特异标记分子。研究表明，CD133高表达的肝癌患者生存期明显较CD133低表达组的短，细胞质表达CD133是影响肝癌患者总生存的非常显著的危险因素。检测肝癌患者外周血CD133表达，分析其与临床病理特征、肿瘤远端转移等的相互关系，具有重要的临床意义。因此，CD133肿瘤标志物在肿瘤靶向治疗中发挥巨大作用，以CD133作为肿瘤靶向治疗的靶点，将有可能为肿瘤治疗带来重大突破。目前，已经报道了各种各样的能够特异性识别CD133的生物分子，包括抗体，核酸以及多肽等。其中，相比于抗体和核酸分子，多肽分子具有多样性，穿透性，易于化学修饰，生物相容性好的优点，因此在肿瘤靶向诊疗中前景广阔。迄今为止，已有很多关于靶向多肽用于肿瘤诊疗的报道，包括小分子多肽和多肽纳米自组装材料等，但是仍然面临很多问题，例如小分子多肽的亲和力较低，稳定性不够；多肽自组装体大多是“积木”形式(识别单元、信号单元以及亲水或疏水单元拼接而成)，在体外严格控制各种条件(溶液纯度、浓度、酸度等)的情况下可形成有序的组装体，然而在活体内却很难发挥良好的协同作用；并且，线性多肽易于蛋白水解降解，很难保持其天然构象，带来低效的细胞穿透性。因此，综上所述，需要开发具有靶向性、特异性且活体稳定的CD133靶向诊疗多肽。

发明内容