[发明专利]一种靶向肿瘤干细胞标志物CD133的订书肽及其应用

权利要求书

1.一种靶向肿瘤干细胞标志物CD133的多肽，其特征在于：其通式为：

SKDEEX₁X₂X₃X₄X₅X₆X₇X₈X₉X₁₀X₁₁X₁₂X₁₃X₁₄X₁₅

其中，S为丝氨酸，K为赖氨酸，D为天冬氨酸，E为谷氨酸，X₁是苯丙氨酸，色氨酸或酪氨酸；X₂是赖氨酸，组氨酸，精氨酸或亮氨酸；X₃是异亮氨酸或亮氨酸；X₄是苯丙氨酸，色氨酸或酪氨酸；X₅是异亮氨酸或亮氨酸；X₆是赖氨酸，组氨酸或精氨酸；X₇是赖氨酸，组氨酸或精氨酸；X₈是赖氨酸，组氨酸或精氨酸；X₉是谷氨酸，天冬氨酸，丝氨酸，谷氨酰胺，天冬酰胺或苏氨酸；X₁₀是酪氨酸，谷氨酸或天冬氨酸；X₁₁是谷氨酸，天冬氨酸，谷氨酰胺或天冬酰胺；X₁₂是亮氨酸或异亮氨酸；X₁₃是谷氨酸，天冬氨酸，谷氨酰胺或天冬酰胺；X₁₄是赖氨酸，组氨酸，精氨酸，甘氨酸或丙氨酸；X₁₅是赖氨酸，组氨酸，精氨酸或甘氨酸。

2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于：所述的氨基酸残基包括：L-型、D-型，或者是L-、D-型的混合；

作为优选，所述多肽的氨基酸序列为：NH₂-SKDEEWHIWIKRHSYNLEGR-Ac(CCP)。

3.一种DNA片段，其特征在于：其包含编码权利要求1或2所述多肽的核苷酸序列。

4.一种表达载体，其特征在于：其包含有至少一个拷贝的如权利要求3所述的DNA片段。

5.一种宿主细胞，其特征在于：其包含有如权利要求4所述的表达载体。

6.如权利要求1或2所述多肽的筛选方法，固相筛选-固相筛选-液相筛选相结合的三轮筛选，其特征在于：所述液相筛选中，使用Fmoc SPPS(固相肽合成)策略，以Wang树脂作为固相载体，合成固相得到的多肽，并通过HPLC(高效液相色谱)纯化；在合成过程中，所述多肽都与DBT-Br偶联，然后将整体转移到96孔板中(每孔中一种多肽)；将新鲜离体CD133活性组织悬浮液添加到板的每个孔中；DBT反应出不同的荧光信号，表明CD133诱导的自组装能力的强弱；最后，根据不同的荧光强度筛选出最终的肽序列。

7.对权利要求1或2所述多肽进行订书得到订书肽，其特征在于：引入两个含有α-烯基的非天然氨基酸X，两个非天然氨基酸X之间发生烯烃复分解反应环化构成全碳大环支架；在所述多肽的氨基酸序列第i与i+n的位置订书(n＝3，4，5，6，7，8，9)；订书后得到订书肽(SCCP)；所述订书肽CD133肿瘤干细胞原位诱导自组装能力增强，成为纳米材料，具有载药能力，靶向作用在CD133。；

作为优选技术方案，本发明的订书肽订书位点为i与i+7。