[发明专利]一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法

权利要求书

1.一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、配制MES缓冲液，调整pH范围为5～6；

步骤二、用pH为7.4的磷酸盐缓冲液配制质量浓度为10%的氨基葡萄糖溶液，将其置于35℃～38℃条件下温和孵育1～3天；

步骤三、在步骤一配制的MES缓冲液中接种大肠杆菌，至大肠杆菌数为10⁶～10⁸logcfu/mL；

步骤四、在步骤三培养的大肠杆菌中加入步骤二温和孵育后的氨基葡萄糖溶液，至氨基葡萄糖的最终质量浓度为2%，形成样品溶液；

步骤五、迅速取一定量的步骤四的样品溶液移入超高压设备内；

步骤六、对样品进行超高压处理，压力为600MPa，温度为20℃，时间为9 min或15 min；

步骤七、将步骤六处理后的样品溶液从超高压设备内取出；

步骤八、进行后续大肠杆菌的菌落培养和总数检测。

2.根据权利要求1所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤二中，将质量浓度10%的氨基葡萄糖溶液置于37℃条件下温和孵育48小时。

3.根据权利要求1所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤三中，大肠杆菌数为10⁷log cfu/mL。

4.根据权利要求1所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤一中，MES缓冲液的pH范围为5.5。

5.根据权利要求1所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤五中，每个样品溶液量为200μ L 。

6.根据权利要求1所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤八中，菌落培养具体包括梯度稀释、涂板和培养，所用培养基为LB培养基。

7.根据权利要求6所述的一种利用天然氨基单糖降低大肠杆菌耐压性的方法，其特征在于：所述步骤八中，将平板放置37℃培养箱进行培养24h后，进行菌落计数，计算原始样品中的大肠杆菌菌落数。