[发明专利]假白榄烷类二萜及其提取方法与应用

说明书

如式1或式2所示的假白榄烷类二萜化合物及其制备方法与其在制备逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物中的应用，具体地说是具有逆转P‑gp介导的肿瘤细胞多药耐药作用的假白榄烷类二萜。化合物1、2无明显细胞毒性，在起到逆转多药耐药作用时，化合物固有毒性甚微，但能显著增强阿霉素对MCF‑7/Adr的抑制，逆转倍数可达3.4至85.9不等。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及两种新的假白榄烷类二萜及其提取方法与应用。

背景技术

癌症是影响人类健康的重大疾病之一，随着人口的老龄化趋势及人口快速增长，全球的癌症发病数和死亡数也在快速增长。癌症正在成为人口死亡的重要原因，并且将是人类提高预期寿命的重要障碍。现有的癌症治疗手段中，化学疗法是重要手段之一。然而，在化疗药物使用过程中，一旦肿瘤细胞获得耐药性，则肿瘤化疗的效果将显著降低。根据统计，在癌症化疗过程中，约有90％的患者由于多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的产生而不能达到预期的治疗效果。寻找低毒有效逆转肿瘤细胞耐药性，增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，从而达到更好治疗与预后效果的需求显得越来越突出。因此，探索肿瘤MDR抑制剂，显得尤为重要。

在抗肿瘤多药耐药机制中，ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporterssuper family)介导的肿瘤多药耐药最普遍，其中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是产生多药耐药性的主要靶点，也是目前研究热点。以P-gp为靶点的肿瘤多药耐药逆转剂，以发展顺序分为以下几类：以维拉帕米(verapamil)为代表的第一代P-gp抑制剂，这类抑制剂特异性结合率低，对人体毒副作用强；以VX-710等为代表的在一代抑制剂结构基础上改造而来的第二代P-gp抑制剂，该类药物干扰体内正常代谢，限制了临床应用。第三代P-gp抑制剂的代表药物为tariguidar，对P-gp蛋白具有较高的亲和力，但此类药物吸收不良，临床效果较差。因此，针对P-gp的抑制剂亟需一种新结构。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺陷，本发明提供两个假白榄烷类二萜化合物及其制备方法与其在制备逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物中的应用，具体地说是具有逆转P-gp介导的肿瘤细胞多药耐药作用的假白榄烷类二萜。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

如式1或式2所示的假白榄烷类二萜化合物，

本发明的两个假白榄烷类二萜为环上多个位点被乙酰基和苯甲酰基取代的化合物。

优选地，所述假白榄烷类二萜化合物为式2所示的化合物。

本发明还提供上述式1或式2所示的假白榄烷类二萜化合物的提取方法，所述式1或式2所示的假白榄烷类二萜化合物提取自甘遂块根，甘遂采购自安徽省亳州市，经鉴定为Euphorbia kansui，样品标本由浙江工业大学药学院天然药物研究所保藏，编号为No.20160810。

所述方法包括乙醇浸提法、萃取、硅胶柱层析、和MCI柱层析等步骤，具体包括如下步骤：

(1)取甘遂块根粉碎，室温条件下，用体积分数为95％的乙醇水溶液浸提，合并提取液，减压浓缩，得甘遂块根提取物；

(2)将步骤(1)得到的甘遂块根提取物用水A溶解后，用石油醚A萃取两次，合并有机相；所述水A的体积以甘遂块根提取物的质量计为1.95～2mL/g，优选1.95mL/g；每次萃取所用石油醚A与水A的体积比为1:1；水A就是指水，此处用水A表示只是为了方便描述，无特殊含义；石油醚A就是指石油醚，此处用石油醚A表示只是为了方便描述，无特殊含义；

(3)取步骤(2)中所得有机相减压浓缩，硅胶柱层析，依次用体积比为20:1、15:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1的石油醚与乙酸乙酯的混合溶液进行梯度洗脱，每个梯度分别洗脱2个柱体积；