[发明专利]一种果胶-阿霉素轭合物及其中间体的制备方法

说明书

本发明涉及一种果胶‑阿霉素轭合物及其中间体的制备方法。本发明的技术方案通过对果胶‑阿霉素轭合物重要中间体的合成的整体路线进行重新设计，提高了合成该中间体小分子化合物的纯度和总收率，具有收率高、后处理简便易纯化的优点；同时节约了两个昂贵的重要原料Fmoc‑NH‑PEGsubgt;8/subgt;‑COOH与阿霉素的用量，减少了其它试剂的耗费，大大降低了成本，提高效率，减少了废料的生成，利于环保，适合大规模生产。

技术领域

本发明涉及药物制备方法领域，特别是涉及一种果胶-阿霉素轭合物及其中间体的制备方法。

背景技术

“果胶-阿霉素轭合物”靶向药物递送系统(PAC)是在大量前期工作和文献研究的基础上，选定果胶作为高分子抗癌前药的载体，并通过对果胶的结构进行修饰，使其可以与多肽-阿霉素共价结合形成水溶性的具有高载药量的果胶-阿霉素轭合物。

PAC是高分子轭合物，粒径在200nm左右，注射后进入循环系统的部分药物可以利用肿瘤组织对大分子物质具有的增强通透和潴留效应(EPR)而蓄积于肿瘤组织中，达到被动靶向的目的。PAC在肿瘤组织中逐渐被肿瘤细胞吞噬，在溶酶体中水解释放出阿霉素，发挥杀伤肿瘤的作用。申请号为CN201910524576.0的专利申请中公开了一种果胶-阿霉素轭合物，克服了果胶和阿霉素直接通过酰胺键键合或酰腙键键合难溶于水而导致的抗肿瘤疗效不佳的问题，但其公开的生产工艺存在诸多问题，例如总收率较低、后处理困难、放大生产存在极大障碍等。上述生产工艺采用的是先将阿霉素接在Fmoc-Val-Ala-PABC(实际上为Fmoc-Val-Ala-PABC-PNPO)中间体上，得到重要中间体Fmoc-Val-Ala-PABC-DOX，再脱除芴甲氧羰酰保护基，得到的Val-Ala-PABC-DOX与Fmoc-NH-PEG₈-COOH缩合得到Fmoc--NH-PEG₈-CO-Val-Ala-PABC-DOX。在这个过程中会遇到两个难度大，且工艺存在严重缺陷的问题：1)脱除芴甲氧羰酰保护基(Fmoc)不易放大，脱掉保护基后的碱性氨基易与阿霉素反应，过程难以控制，产品不易纯化；2)Val-Ala-PABC-DOX与Fmoc-NH-PEG₈-COOH缩合的反应转化率不高，副产物生成较多，在处理纯化过程中必须采用柱层析(通过正相体系柱层析几乎无法解决存在的吸附拖尾)，且分离困难，收率低。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种收率高、后处理简便、生产成本低、利于环保、适合大规模生产的果胶-阿霉素轭合物及其中间体的制备方法。

本发明为实现上述目的采用的技术方案是：一种果胶-阿霉素轭合物中间体的制备方法，所述果胶-阿霉素轭合物中间体具有如式(I)所示结构：

b-c-d-e(I)

式(I)中，b的主体结构为PEG_n，c为酶促裂解集团、多肽或多肽衍生物，d为自降解基团，e为阿霉素DOX；

所述果胶-阿霉素轭合物药物，具有结构：聚合物-肽连接子-阿霉素偶联药物a-b-c-d-e，其中聚合物a优选果胶；

基于聚合物的阿霉素偶联药物的肽连接子中间体b-c-d-e经优化的制备方法的具体步骤如下：

1)由Fmoc-b-c-d制备Fmoc-b-c-d-e；

2)在非亲核碱性试剂存在下脱去Fmoc保护基得到b-c-d-e。

进一步地，式(I)中，n为1-20的整数，c为二肽、二肽衍生物、三肽、三肽衍生物、四肽或四肽衍生物中的任意一种；

进一步地，n为6-12的整数；再优选的，n为8；

进一步地，c为Val-Ala；

进一步地，d在直接与e连接的情况下表示自降解基团氨基苄氧羰基；