[发明专利]一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法

权利要求书

1.一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：通过测定唾液中的唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量确定人体的疲劳状态；所述唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量与人体的疲劳状态为正相关关系。

2.根据权利要求1所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：先用比色法检测唾液稀释液中的唾液淀粉酶的含量，初步得到人体的疲劳状态的结论；再用高通量的液相-质谱联用方法检测唾液制备液的免疫球蛋白K的含量，得到人体的疲劳状态的结论；二者结论一致，最终确定人体的疲劳状态的结论。

3.根据权利要求1所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述唾液的收集时受试人要先用生理盐水漱口三次，再用清水漱口三次，然后收集唾液；所述唾液收集量不少于1mL。

4.根据权利要求2所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述唾液稀释液的配制方法为取0.1ml新鲜唾液用磷酸盐缓冲溶液稀释100倍。

5.根据权利要求2所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述唾液制备液的制备方法为将唾液进行离心处理得到上清液，向上清液中滴入蛋白质提取剂后冷冻一段时间，得到冷冻液；将冷冻液进行离心处理，取出下层液并再次冷冻，得到蛋白干粉；将蛋白干粉溶于水化液中，并离心处理，制得唾液制备液。

6.根据权利要求4所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲溶液的pH为6.5～7.5，且其中含8～10mmol/L的磷酸氢二钠和2～5mmol/L的磷酸二氢钾。

7.根据权利要求4所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述新鲜唾液储存时需加入蛋白酶抑制剂，所述蛋白酶抑制剂为亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑弹性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素的混合物，储存温度为-80～-70℃。

8.根据权利要求2所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：所述初步得到的结论与最终得到的结论不一致时，结果无效，重复进行唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量检测。

9.根据权利要求1-8任意一项权利要求所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：当唾液中的唾液淀粉酶＜150ng/ml时为非疲劳，当唾液中的唾液淀粉酶≥150ng/ml且＜350ng/ml时为轻度疲劳，当唾液中的唾液淀粉酶＞650ng/ml时为重度疲劳。

10.根据权利要求1-8任意一项权利要求所述的一种利用唾液中的蛋白组合物快速检测人体疲劳的方法，其特征在于：当唾液中的免疫球蛋白K＜30ng/ml时为非疲劳，当唾液中的免疫球蛋白K≥30ng/ml且＜200ng/ml时为轻度疲劳，当唾液中的唾液淀粉酶＞350ng/ml时为重度疲劳。