[发明专利]基于纳米金的分裂型适体传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将核苷酸链P2加入Tris-HCl溶液中反应2h进行激活，得P2溶液；

（2）向P2溶液中加入AuNPs，常温反应20min后，再加入柠檬酸钠溶液并在37℃恒温振荡培养3 h，再离心取底液即得到AuNPs@P2耦合物；

（3）向AuNPs@P2耦合物中加入核苷酸链P1，室温培养2h，即得基于纳米金的分裂型适体传感器工作液。

2.根据权利要求1所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，核苷酸链P2的序列如5′-TGCGGAGGAAGGT-(CH₂)6-SH-3′所示。

3. 根据权利要求1所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，Tris-HCl溶液的pH=7、浓度为10 mmol/L，P2溶液的浓度为5 μmol/L。

4. 根据权利要求1所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，AuNPs的浓度为1 nmol/L，柠檬酸钠溶液的浓度为500 mmol/L、pH=5。

5.根据权利要求4所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述P2溶液、AuNPs和柠檬酸钠溶液的体积比为20:8:1。

6. 根据权利要求1所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，离心的条件为14000 r/min离心15min。

7.根据权利要求1所述的基于纳米金的分裂型适体传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中，核苷酸链P1的序列如5′-FAM-ACCTGGGGGAGTAT-3′所示，AuNPs@P2耦合物与核苷酸链P1的物质的量比为1:1。

8.权利要求1-7任一项制备方法所制备的分裂型适体传感器。

9.权利要求8所述的分裂型适体传感器在非疾病的诊断和治疗中检测三磷酸腺苷中的应用。

10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，步骤如下：向工作液中加入20μL待测样品用500 mmol/LTris-HCl缓冲液将溶液的总体积定容至600 μL，利用荧光分光光度计对含有ATP的AuNPs@P2-ATP-P1复合物进行荧光检测，将荧光强度代入线性回归方程Y=66.54-7.31X，相关系数R=0.99，即可得到待测样品的浓度。