[发明专利]同时检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分的HPLC法

说明书

本发明提供了同时检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分的HPLC法，8种活性成分包括盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、绿原酸、黄芩苷、甘草苷、甘草酸和迷迭香酸；步骤包括：量取待测小儿麻甘颗粒样品，加入醇类‑乙醚混合溶液后提取得到供试品溶液；注入到高效液相色谱仪中，采用HPLC法测试后得到色谱图；以外标法计算得到小儿麻甘颗粒中8种活性成分的含量。本发明通过采用3‑吡啶基甲氧胺衍生化试剂进行衍生化处理，可提高灵敏度，并能准确有效地定量检测低丰度的活性成分；通过优化流动相和梯度洗脱方式，提高色谱峰之间的分离度，检测方法灵敏度高；该方法检测速度快，灵敏度高、精确度高，重复性好。

技术领域

本发明涉及药物活性成分的检测技术领域，更具体地，涉及同时检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分的HPLC法。

背景技术

小儿咳嗽是一种临床的常见疾病，但却很少能快速治愈。目前，口服化学药物和输液都不能完全快速治愈咳嗽；相比而言，中药制剂副作用小，即便是用药周期稍长(7-10天)也不会有副作用显现，于是中药的优势得到显著体现。

小儿麻甘颗粒来源于医圣张仲景的《伤寒杂病论》中的经典名方，由麻黄、黄芩、苦杏仁、石膏、甘草、紫苏子、桑白皮、地骨皮等8味中药组成；其具有平喘止咳和利咽袪痰的功效，用于治疗小儿肺炎、喘咳和咽喉炎症，其效果明显，且安全性好。

现有小儿麻甘颗粒的成品质量标准中仅有盐酸麻黄碱的含量测定方法，只对成品中麻黄药材有控制指标，而中成药发挥疗效是靠多种活性成分配合，共同作用才能达到预期效果。因此，活性成分的含量测定是中药质量标准中的关键内容之一，对于复方制剂而言，仅针对制剂中的某单一成分或较少的几种成分进行含量测定，是难以客观、全面和灵敏地反应小儿麻甘颗粒制剂质量情况的，即难以全面控制中药制剂的质量。

综上所述，如何准确定量检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分是本领域技术人员亟需解决的关键技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分的HPLC法，该方法具有检测速度快、灵敏度高、精确度高和重复性好等优点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

同时检测小儿麻甘颗粒中8种活性成分的HPLC法，

所述8种活性成分分别为：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、绿原酸、黄芩苷、甘草苷、甘草酸和迷迭香酸；

具体包括以下步骤：

S1、量取待测小儿麻甘颗粒样品，加入醇类-乙醚混合溶液后提取，得到供试品溶液；

S2、注入到高效液相色谱仪中，采用HPLC法测试后得到色谱图；

S3、以外标法计算得到小儿麻甘颗粒中8种活性成分的含量；

步骤S2中，所述HPLC法采用的流动相A和流动相B分别为乙腈和0.08-0.12％磷酸水溶液。

本发明通过大量的研究得出，采用上述流动相，可有效提高盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱、黄芩苷与迷迭香酸的分离度。

在上述技术方案中，步骤S2中，还包括，在注入到高效液相色谱仪之前，采用3-吡啶基甲氧胺衍生化试剂对供试品溶液进行衍生化处理。

进一步地，在上述技术方案中，所述衍生化处理包括，依次加入三氟乙酸和3-吡啶基甲氧胺/乙醇溶液进行衍生化反应，所述3-吡啶基甲氧胺/乙醇溶液与三氟乙酸的体积比6-7.5：1。

优选地，在上述技术方案中，所述3-吡啶基甲氧胺/乙醇溶液的浓度为3.5-8.8mg/mL。

详细地，在一个具体实施例中，所述衍生化处理的反应温度和时间分别为20-35℃和15-35min。