[发明专利]一株高产耐碱脂肪酶的毕赤酵母工程菌

权利要求书

1.一种包含脂肪酶编码基因的重组质粒或重组菌株，其特征在于，所述脂肪酶氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述的重组质粒或重组菌株，其特征在于，所述脂肪酶编码基因如序列表SEQ ID NO.3所示。

3.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，表达载体为pPIC9。

4.如权利要求1所述的重组菌株，其特征在于，宿主细胞为毕赤酵母GS200。

5.权利要求1所述重组质粒或重组菌株在生产脂肪酶中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，采用权利要求4所述重组菌株发酵生产脂肪酶，方法如下：

发酵培养：接种量10-15%，培养温度30-31℃，转速200-800 rpm，风量2 m³/h-6 m³/h，通风搅拌培养，pH 5.0-5.5，周期0-20 h，流加碳源40-50%葡萄糖，流加速度为600-800 g/h，溶氧20-30%，培养20h至菌体湿重160-180g/L；停补碳源，溶氧反弹至80%以上，保持1小时；流加甲醇，流加速度为50-200g/h，控制溶氧20-30%，培养130h左右至发酵结束。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，发酵培养基配方：4-5%甘油，1-2%磷酸二氢铵，0.5-1%磷酸二氢钾，0.5-1%硫酸镁，0.5-0.8%硫酸钾，0.05-0.1%硫酸钙，0.2-0.5%氢氧化钾，其余为水，pH5.0-5.5。