[发明专利]免疫调节性提高的细胞及其使用和生产方法

说明书

本发明涉及免疫调节性提高的细胞及其使用和生产方法。本发明涉及增加细胞群中PD‑L1和/或IDO‑1的表达的组合物和方法，表达增加的PD‑L1和/或IDO‑1的经调节的细胞，以及与通过表达增加的PD‑L1和/或IDO‑1的细胞所获得的免疫抑制作用有关的方法。

相关申请

本申请为2016年1月26日提交的、发明名称为“免疫调节性提高的细胞及其使用和生产方法”、申请号为201680018098.0的中国发明专利申请的分案申请。

相关申请的引用

本发明申请主张2015年1月26日提交的美国临时专利申请第62/107,517号和2015年2月6日提交的美国临时专利申请第62/112,653号的35 U.S.C.§119(e)的权益，以上每项专利以其全部内容作为参考并入本文。

发明背景

不受控制的免疫激活可能是致死的，并因此免疫系统是密切调节的，其部分通过对改变免疫细胞功能的炎症起反应的途径进行调节。

PD-L1也称为B7-H1，它是属于T细胞共抑制分子B7家族的跨膜蛋白质。PD-L1与其受体PD-1的结合减弱了T细胞的激活、降低了细胞毒性增殖并引起了细胞凋亡。一旦PD-L1表达增加，则造血干细胞和祖细胞(HSPC)的免疫调节性也提高。已在癌症免疫疗法中描述了PD-L1阻断T细胞激活和增殖的作用。更具体地，PD-L1能够通过竞争T细胞上的共刺激分子(例如，B7-1和/或B7-1)和通过T细胞上PD1的直接接合防止T细胞激活。因此，PD-L1能够以细胞接触依赖性方式调节T细胞激活。此外，HSPC-基免疫疗法的治疗潜能似乎受PD-L1的内在低表达水平的限制。

尽管在离体培养后观察到HSPCs上PD-L1水平的提高，但是延长培养期可以导致复制应激反应、随机细胞缺陷和染色体异常。

IDO-1(吲哚胺2，3-加双氧酶)是催化必需氨基酸色氨酸(TRP)降解的酶。微环境中色氨酸的减少使T细胞增殖停止、引起TH1细胞凋亡并激活调控T细胞。这种免疫抑制方法还被多种其他免疫抑制细胞天然地使用，并且还被多种肿瘤使用来逃避免疫激活作用。尽管IDO酶是胞内的并且是非分泌的，但是由于邻近细胞对TRP接近降低起反应，IDO-1的代谢作用起初提供局部作用，然而，由于微环境缺少TRP，邻近但不与IDO-1表达细胞接触的细胞受影响。因此，在自身免疫情况中，IDO-1通过消除来自炎症性微环境的TRP来防止T细胞激活和增殖，并且激活调控T细胞的免疫应答抑制。在正常情况下，造血干细胞或祖细胞中IDO-1的表达是极低的。因此，造血干细胞和祖细胞中IDO-1水平的调节提供了影响那些细胞的免疫调节性的机会，并且一旦施用，影响患者细胞的免疫学性质。

因此，本领域所需要的是用于产生PD-L1和/或IDO-1表达增加的HSPCs，但不将细胞暴露于体外过程和延长的细胞培养的应激的方法。

本发明通过一些分子或化合物的鉴别解决了这些限制，所述分子或化合物独立或组合地在短期孵育中药理学上调细胞，包括HSPCs上的PD-L1和/或IDO-1表达。

发明概述

本发明公开提供了通过表达增加水平的程序性死亡配体1(PD-L1)和吲哚胺2，3-加双氧酶1(IDO-1)的细胞的免疫调节性调节免疫系统的组合物和方法。本发明公开涉及提高细胞群中PD-L1和/或IDO-1的表达的组合物和方法，表达增加的PD-L1和/或IDO-1的受调节的细胞和与通过表达增加的PD-L1和/或IDO-1的细胞所获得的免疫抑制作用有关的方法。

本发明的第一目标包括用于调节细胞群的方法，其包括：在存在能够增加PD-L1和/或IDO-1表达的一种或多种外源试剂的情况下孵育所述细胞群以获得PD-L1和/或IDO-1表达增加的细胞群。

在一个方面，所述孵育是体外的或离体的。