[发明专利]一种检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的免疫层析试纸条、制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的免疫层析试纸条、制备方法及其应用。本发明制备的免疫层析试纸条，具有良好的灵敏度、特异性和稳定性，且储存方便、保存期长、操作简单，检测速度快，适用于猫泛白细胞减少综合征病毒感染的快速诊断。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，涉及一种检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的免疫层析试纸条、制备方法及其应用。

背景技术

猫泛白细胞减少综合征病毒 ( feline panleukopenia virus，FPV) 又称猫细小病毒、猫传染性肠炎病毒或猫瘟病毒，能引起急性、高度接触性传染病，以高热、呕吐、肠炎和白细胞严重减少为特征。该病毒主要感染猫科和鼬科等多种动物，是目前肉食动物细小病毒属中感染范围最广、致病性最强的一种病毒。且幼龄动物感染性较高，对野生动物和宠物猫造成了很大的威胁。该病在世界范围内存在，我国多地均有本病发生，对猫及其它猫科动物危害极大。针对该病免疫，有多种商品化疫苗( 荷兰英特威、美国辉瑞和法国维克等)可以选择，但是针对该病的诊断试剂却参差不齐，因此，建立一种快速灵敏、特异性强、操作简单、经济实用的诊断方法势在必行。

FPV病毒在电子显微镜下观察，呈等轴对称的正二十面体结构，外层没有囊膜包裹，粒子直径在20-25nm之间。该病毒是一种线性、单链的DNA病毒，基因组长约为5123bp。FPV主要由两种蛋白组成，分别是结构蛋白(VP1，VP2)和非结构蛋白（NS1，NS2）。结构蛋白包括；VP1蛋白，分子量73KD，共编码727个氨基酸；VP2蛋白，分子量为60KD，共编码584个氨基酸，VP2蛋白是细小病毒衣壳的最主要成分，该蛋白中某些关键位点的氨基酸变化会导致细小病毒的抗原特性和细胞向性发生改变，同时也会造成细小病毒发病机制的改变。VP2蛋白的三级结构主要由Loop1 ~ Loop5这5个环状结构形成，其中Loop1、Loop2和 Loop4共同构成病毒蛋白的三折叠单元纤突最顶端的结构，而环Loop3是组成病毒三折叠蛋白单元纤突的肩部。VP2 蛋白上有很多特定的抗原结合位点，而上述的五个 Loop环是组成 VP2 蛋白的关键氨基酸位点，同时这些特异性氨基酸能够与相对应的病毒单克隆抗体结合，因此，当Loop环上的氨基酸发生突变时会影响病毒与单克隆抗体结合。

猫泛白细胞减少综合征病毒主要是通过疫苗预防，而疫苗免疫动物与感染动物体内都会产生结构蛋白抗体，因此检测结构蛋白抗体的诊断方法能确定动物对病毒株的抵抗力。同时日常监测疫苗产生抗体是对群体的日常监测选择疫苗、评估免疫程序合理性、掌握健康状态的重要手段，同时也可从侧面反映管理是否合理，也是适时注射疫苗的主要依据。

目前已建立的用于检测FPV抗体的血清学方法主要有酶联免疫吸附试验、病毒中和抗体试验、乳胶凝集试验，血凝抑制试验等。血凝抑制试验需要新鲜且敏感性高的红细胞，检测时间需要2～3h；中和试验操作繁琐，需要较高的试验条件和操作水平，整个试验周期长；酶联免疫吸附方法操作要求高，需要酶标仪测定结果，且不适合做单个样本的检测。上述的种种不便都限制了它们在猫细小病毒抗体临床检测中的应用。

本发明专利的目的就是克服以上几种方法的缺点，建立一种操作简便、灵敏、特异、快速的猫泛白细胞减少综合征病毒抗体定性检测方法，应用于猫泛白细胞减少综合征病毒免疫效果的监测，从而限制猫泛白细胞减少综合征病毒的流行。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种用于检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的抗原。

本发明的目的之二在于提供一种利用上面所述的抗原制备而成的免疫检测产品。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：