[发明专利]一种检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的免疫层析试纸条、制备方法及其应用有效
| 申请号: | 202011413135.2 | 申请日: | 2020-12-07 |
| 公开(公告)号: | CN112194709B | 公开(公告)日: | 2021-04-09 |
| 发明(设计)人: | 于在江;吴迪;郭秀锋;李铁刚;张德红;袁志波 | 申请(专利权)人: | 北京纳百生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/015 | 分类号: | C07K14/015;C12N15/35;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558 |
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| 地址: | 100000 北京市大兴区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 泛白 细胞 减少 综合征 病毒 抗体 免疫 层析 试纸 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的抗原,其特征在于,所述抗原是肽段P5-P12,所述肽段P5-P12的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示。
2.编码权利要求1所述的抗原的DNA分子;其中,编码所述肽段P5-P12的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示。
3.包含权利要求2所述的DNA分子的载体或包含所述载体的宿主细胞。
4.权利要求1所述的抗原的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括将猫泛白细胞减少综合征病毒VP2蛋白的第333位-第400位的肽段与猫泛白细胞减少综合征病毒VP2蛋白的第22位-第235位的肽段连接。
5.一种猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的免疫检测产品,其特征在于,所述免疫检测产品包括权利要求1所述的抗原。
6.根据权利要求5所述的免疫检测产品,其特征在于,所述免疫检测产品包括ELISA试剂盒、免疫层析试纸条、含有所述免疫层析试纸条的检测卡、含有所述免疫层析试纸条或所述检测卡的试剂盒。
7.根据权利要求6所述的免疫检测产品,其特征在于,所述免疫层析试纸条包括底板,以及顺次相互搭接粘附在底板上的样品吸收垫、结合物释放垫、包被有检测线T和质控线C的反应垫、吸水垫;
结合物释放垫喷涂有胶体金标记的链霉亲和素与山羊抗猫抗抗体-生物素偶联物形成的结合物;
所述山羊抗猫抗抗体为山羊抗猫IgG的IgG;
所述检测线T包被有权利要求1所述的抗原;所述抗原的浓度为5μg/mL,包被量为1.0μL/cm;
所述质控线C包被有兔抗山羊抗抗体;兔抗山羊抗抗体为兔抗山羊IgG的多抗;所述兔抗山羊抗抗体为200μg/mL,包被量为1.0μL/cm。
8.权利要求7中所述的免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
(1)制备喷涂有山羊抗猫抗抗体-生物素偶联物和胶体金标记的链霉亲和素形成的结合物的结合物释放垫;
(2)制备包被有检测线T和质控线C的反应垫:用PBS稀释兔抗山羊抗抗体在硝酸纤维素膜上划线形成质控线C,用PBS稀释权利要求1所述的抗原在硝酸纤维素膜上划线形成检测线T,室温干燥1-2h;将含有1% BSA的PBS溶液均匀滴加在硝酸纤维素膜上,室温封闭1h后,干燥后备用;
稀释后的兔抗山羊抗抗体浓度为200μg/mL,质控线C上所述兔抗山羊抗抗体的包被量为1.0μL/cm;
稀释后的所述的抗原浓度为5μg/mL,检测线T上所述抗原的包被量为1.0μL/cm;
(3)在底板上,将所述反应垫、所述样品吸收垫、所述结合物释放垫、所述吸水垫按如下工艺组装在一起:所述反应垫的底面粘贴在所述底板上面,在所述反应垫的两端上分别粘贴所述结合物释放垫和所述吸水垫,在所述结合物释放垫的另一端粘贴所述样品吸收垫。
9.一种非诊疗目的的体外检测猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的方法,所述方法包括如下步骤:利用权利要求1所述的抗原或权利要求5所述的免疫检测产品检测包含猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的样品。
10.如下任一项所述的应用:
权利要求1所述的抗原在制备猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的检测产品中的应用;
权利要求1所述的抗原在制备猫泛白细胞减少综合征病毒感染的诊断产品中的应用;
权利要求6所述的免疫检测产品在制备猫泛白细胞减少综合征病毒抗体的检测产品中的应用;
权利要求6所述的免疫检测产品在制备猫泛白细胞减少综合征病毒感染的诊断产品中的应用。
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