[发明专利]苦瓜蛋白MAP30在制备预防和治疗卵巢癌的药物或化疗补充剂中的用途

权利要求书

1.苦瓜蛋白MAP30在制备预防和/或治疗卵巢癌的药物或化疗补充剂中的用途。

2.苦瓜蛋白MAP30和顺铂在制备预防或治疗卵巢癌的药物或化疗补充剂中的用途。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述卵巢癌为晚期卵巢癌或化疗耐药的卵巢癌。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中所述预防和/或治疗卵巢癌为抑制卵巢癌细胞生长、细胞迁移/侵袭，卵巢癌生长和/或卵巢癌定殖。

5.苦瓜蛋白MAP30在制备AMPK激活剂中的用途。

6.苦瓜蛋白MAP30在制备预防和/或治疗与AMPK的激活受抑制有关的疾病或症状的药物中的用途。

7.一种用于预防和/或治疗卵巢癌的药物组合物，其包含苦瓜蛋白MAP30和顺铂。

8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述苦瓜蛋白MAP30和顺铂的质量比为1：(0.6～1.8)，优选为1：(1.0～1.4)，更优选为1：1.2。

9.根据权利要求1至6中任一项所述的用途或根据权利要求7或8所述的药物组合物，其中所述苦瓜蛋白MAP30为天然苦瓜蛋白MAP30；

优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30是从泰国苦瓜或中国苦瓜分离的；更优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30是从中国苦瓜分离的；进一步优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30是从中国台湾苦瓜分离的；

优选地，所述苦瓜蛋白MAP30的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或2所示；

优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30为经糖基化修饰的天然苦瓜蛋白MAP30；更优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30的糖基化修饰位点位于SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中第74位天冬酰胺。

10.根据权利要求9所述的用途或药物组合物，其中所述天然苦瓜蛋白MAP30的制备方法包括以下步骤：

(1)将苦瓜种子浸泡后进行均质化，离心，取上清液；

(2)采用含1M NaCl的20mM Tris-HCl缓冲液洗脱负载到Affi-gel蓝凝胶柱上的上清液，将洗脱的包含天然苦瓜蛋白MAP30的部分透析；

(3)采用含1M NaCl的20mM NH₄OAc缓冲液洗脱负载到SP-琼脂糖柱上的经透析的部分，将洗脱的包含天然苦瓜蛋白MAP30的部分透析；

(4)采用含0.1M NaCl的50mM Tris-HCl缓冲液对负载到Superdex 75HR 10/300柱上的透析的部分进行FPLC-凝胶过滤，收集在OD 280nm处的第一个峰；

优选地，所述天然苦瓜蛋白MAP30的制备方法包括以下步骤：

(1)将苦瓜种子浸泡后进行均质化，离心，过滤取上清液；

(2)采用含1M NaCl的20mM Tris-HCl缓冲液洗脱负载到Affi-gel蓝凝胶柱上的上清液，将洗脱的包含天然苦瓜蛋白MAP30的部分在截留分子量为8kDa透析管中透析；

(3)采用含1M NaCl的20mM NH₄OAc缓冲液洗脱负载到SP-琼脂糖柱上的经透析的部分，将洗脱的包含天然苦瓜蛋白MAP30的部分透析，并冻干；

(4)采用含0.1M NaCl的50mM Tris-HCl缓冲液将冻干粉末再悬浮，采用相同缓冲液对负载到Superdex 75HR 10/300柱上的悬浮液进行FPLC-凝胶过滤，收集在OD 280nm处的第一个峰，用截留分子量为3kDa的centricon透析，并冻干成粉末。