[发明专利]一种盐酸土霉素微生物限度检验方法

说明书

本发明属于微生物限度检验技术领域，具体涉及一种盐酸土霉素微生物限度检验方法，该方法包括培养基和稀释剂准备、实验用具的准备、检测样品溶液制备、霉菌及酵母菌总数样品检测、霉菌及酵母菌总菌落数报告、需氧菌总数样品检测、需氧菌菌落总数报告的步骤；通过聚乙二醇200或甘油缩甲醛及其浓度的选择，增加了样品的溶解性，实现了很好的样品溶解效果，提高了检测精度而且提高了菌落回收率。

技术领域

本发明属于微生物限度检验技术领域，具体涉及一种盐酸土霉素微生物限度检验方法。

背景技术

微生物限度检查法系检查非无菌制剂及原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括需氧菌总数、霉菌数和酵母菌总数的检查。微生物限度检查应在环境洁净度不低于D级下的局部B级的单向流空气区域内进行，检查的全部过程应严格遵守无菌操作，防止微生物再污染。并定期对工作台面及环境进行浮游菌、沉降菌、尘埃粒子、表面微生物的检测，确保检查环境满足检测要求。

检测项目	限度标准	检测频率
需氧菌总数	≤1000cfu/g	次/批
霉菌和酵母菌总数	≤100cfu/g	次/批

现有的微生物限度检测方法主要包括平皿法和薄膜过滤法，对于盐酸土霉素来说，由于其自身存在一定的抗菌性，所以采用薄膜过滤法进行检查比较合适。但是由于该产品溶解性问题，盐酸土霉素存在在水溶液中溶解时间短暂，短时间内结晶析出的问题，使得该产品的微生物限度检验难以进行，影响检测结果，所以急需开发一种能够增加样品溶液稳定性的检测方法。

发明内容

本发明为了解决上述现有技术中存在的问题，本发明提供了一种盐酸土霉素微生物限度检验方法，能够解决盐酸土霉素溶解稳定性问题，提高了检测精度。

本发明采用的具体技术方案是：一种盐酸土霉素微生物限度检验方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)、准备培养基、稀释液、冲洗液及实验用具

培养基：沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)或大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)，稀释液：20％无菌聚乙二醇200或20％无菌甘油缩甲醛，冲洗液：0.9％无菌氯化钠溶液；

实验用具：实验用250ml具塞三角瓶、100ml量筒、镊子、内装0.45um滤膜的滤器、5ml吸头，上述用具用呼吸袋封好，121～124℃条件下蒸汽灭菌30～31分钟；

(2)、制备检测样品溶液

A、在洁净室内超净工作台上，把10g盐酸土霉素样品，加入250ml具塞三角瓶中，用灭菌量筒准确量入灭菌的稀释液至100ml，充分振摇，作为1：10的样品溶液；